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酸化血清溶血試驗

時間：2013-12-20閱讀：1233
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實驗原理
　　陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(PNH)患者的紅細胞由于膜的缺陷，對補體的敏感性增加，這些對補體敏感的紅細胞能被正常血清 所溶解，特別在血清 酸性條件下(pH6.4-6.5)經(jīng)37℃孵育，溶血更明顯。

實驗方法
　　材料：
　　1.0.25mol/LHCL
　　2.0.85%生理鹽水
　　3.離心機 、試管 、水浴 箱等
　　方法：
　　1.取靜脈血2-3ml，取下針頭，將血輕輕注入試管 中；
　　2.離心吸出血清備用；
　　3.將血塊搗碎，用生理鹽水洗滌3次，配成50%紅細胞懸液備用；
　　4.按下表進行操作；
待測管(ml)
對照管(ml)
0.5
/
0.025
0.025
/
0.5
0.05
0.05
　　5.兩管均加塞，置37℃水浴 箱中1h后直接觀察或者離心后觀察結(jié)果。
 
實驗結(jié)果計算
　　溶血為陽性，不溶血為陰性

注意事項
　　1.本實驗不用抗凝血，因抗凝劑會阻礙溶血，降低敏感性，出現(xiàn)假陰性；
　　2.血清酸化后立即塞緊管口，以防二氧化碳逸出；
　　3.血清需新鮮，以免補體失活，造成假陰性；
　　4.實驗用具要干燥，針頭要粗，紅細胞懸液要直接滴入液體，不要沿管壁流下，以免溶血。

 

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