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大鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒

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更新時間:2018-01-25 06:24:12瀏覽次數(shù):297次

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大鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒實驗規(guī)則: 

1、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。         

2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。

3、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。 

4、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。 

5、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫6作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可*保存。

大鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒常見ELISA操作過程中的問題:

1.溫育 溫育是ELISA測定中影響測定成敗zui為關(guān)鍵的一個因素。ELISA作為一種固相免疫測定,抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結(jié)合,必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時間。溫育所需時間與溫度成反比,即溫度越高,則所需時間相對較短。zui為常用的溫育溫度有37℃和室溫,其次是43℃和2~8℃。一些操作者,擅自改變說明書操作,使用自己喜歡的溫育時間和溫育溫度,這樣造成一些不必要的麻煩。因為,不同試劑盒有不同的溫育時間和溫育溫度的選擇,隨意更改溫育時間或者溫育溫度將導(dǎo)致試驗結(jié)果出現(xiàn)偏差。

2.試劑盒平衡 試劑盒中所有試劑和板條均應(yīng)在試驗前平衡至室溫(約25℃),一般需在室溫放置20~30分鐘以上。平衡時間太短會造成試劑混勻不夠,樣品孵育時間相對縮短,ELISA反應(yīng)不夠充分。冬季室溫低,可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘。

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