C1498細(xì)胞專用培養(yǎng)基

產(chǎn)品名稱：C1498細(xì)胞專用培養(yǎng)基

產(chǎn)品貨號：TCM-G785

培養(yǎng)體系：DMEM-H+10%FBS+1%P/S

產(chǎn)品規(guī)格：500mL / 200mL / 125mL

產(chǎn)品形態(tài)：液體

生物安全檢測：細(xì)菌、真菌、支原體檢測陰性

內(nèi)毒素含量：＜10 EU/mL

儲存條件：2-8℃，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸

有效期：3 months

使用C1498細(xì)胞專用培養(yǎng)基進(jìn)行C1498小鼠白血病細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

一、貼壁細(xì)胞傳代方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
二、懸浮細(xì)胞傳代方法：
方法1：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法2：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

1）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。棄培養(yǎng)基后加入少量，細(xì)胞變圓脫落后，進(jìn)行離心收集，1000RPM條件下離心8-10分鐘，去除上清，按凍存數(shù)量加入到凍存液中。

三、注意事項

(1) C1498細(xì)胞專用培養(yǎng)基含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。

(2) 使用前請將產(chǎn)品提前置于室溫或37°C充分預(yù)熱。

(3) 使用產(chǎn)品時應(yīng)注意無菌操作，避免污染。

(4) 使用產(chǎn)品時請做好個人防護(hù)。

(5) 為保持本產(chǎn)品的使用效果，不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。

(6) 所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，請放棄使用。