干細胞成骨誘導分化試劑-成人骨髓間充質干細胞

中文名稱：成人骨髓間充質干細胞成骨誘導分化試劑盒 

英文名稱：Human Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells Osteogenic Differentiation Kit

貨號：BMHX-D101 

規(guī)格：200 mL/Kit

質檢標準 pH：7.2~7.4 

內毒素含量：＜10 EU/mL 

生物安全：細菌、真菌、支原體檢測陰性

質量檢測：誘導測試合格

運輸方式：產品冰袋冷藏運輸

 產品描述：

干細胞成骨誘導分化試劑是海星生物專為成人骨髓間充質干細胞研制優(yōu)化的HyCyteTM成骨誘導分化培養(yǎng)基試 劑盒，用于增強成人骨髓間充質干細胞向成骨細 胞方向誘導分化的能力。在庫產品均通過生物安 全檢測和產品質量檢測，體系穩(wěn)定有效，現(xiàn)貨供應，性價比高。

 | 檢驗原理 

茜素紅是一種廣泛應用于生物醫(yī)學樣本檢 驗的示鈣染劑，游離的鈣離子不能與茜素紅形成 紅色沉淀，而固化的鈣質結節(jié)則能被染成紅色。 干細胞在誘導培養(yǎng)基作用下，會逐漸向骨細胞方 向分化，產生明顯的泌鈣反應，形成鈣鹽結晶或 鈣質結節(jié)，均能被茜素紅染色。

 干細胞成骨誘導分化試劑使用說明：

1. 成骨誘導分化操作 

1.1 明膠包被培養(yǎng)器皿 干細胞培養(yǎng)較長時間后，可能會出現(xiàn)脫壁卷 邊或漂浮現(xiàn)象，建議使用0.1%明膠溶液對培養(yǎng)器 皿進行包被。準備合適的培養(yǎng)器皿，取適量明膠 覆蓋底面，37°C靜置30 min，吸取晾干即可使用。

 1.2 接種干細胞 取對數(shù)生長期的細胞， 按 照 2.0×10e4 cells/cm2 的細胞密度接種至包被后的培養(yǎng)器皿中， 于 37℃，5% CO2 培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)至匯合度 60~70%，棄掉上清，加入成骨誘導分化培養(yǎng)基。

 1.3 細胞分化誘導 于37℃，5% CO2培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)約14~21天， 每2~3天換液一次，并注意觀察細胞形態(tài)變化。 根據(jù)細胞鈣鹽結晶析出和鈣質結節(jié)形成的情況， 決定終止細胞誘導的時間，并進行染色鑒定。 

2. 染色鑒定

 2.1 細胞固定 吸去培養(yǎng)基使用適量1×PBS清洗一次，棄去 后取適量4%中性覆蓋培養(yǎng)器皿底面，室 溫固定30~60 min，棄去固定液再使用1×PBS清洗 兩次。 

2.2 茜素紅染色 加入適量茜素紅染色液染3~5 min，吸走茜 素紅染色液，用1×PBS清洗兩次，并加入適量1× PBS避免細胞干燥。 

2.3 誘導評估 顯微鏡下觀察成骨染色效果，并進行圖像采 集和誘導評估。誘導成功時，鈣質結節(jié)與茜素紅 染料結合后呈現(xiàn)紅色或橘紅色。 NOTE: 干細胞的成骨分化水平因細胞類型、細胞供體來 源，培養(yǎng)條件、細胞代次、細胞狀態(tài)和分化時間等因素而異。