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上海茁彩生物科技有限公司

茁彩生物|脂肪酸檢測

時間:2022-8-29閱讀:153
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項目介紹:


氣相色譜檢測可以被分為氣液色譜氣相色譜,氣液色譜是流動相是氣體,固定相是液體的色譜分離方法,氣固色譜是流動相是氣體,固定相是固體的色譜分離方法,如活性炭、硅膠等固定相。氣相色譜法檢測分離的原理是利用待測物質的沸點、極性和吸附性差異對比來進行混合物的分離檢測,在待檢測的氣體氣化后被載氣帶入色譜柱,由于樣品中各組分的沸點、極性或吸附性能的不同,每種組分都會在流動相和固定相之間形成吸附平衡。但正是由于載氣的流動,使樣品組分在運動中進行反復多次的吸附與解吸附,最后讓在載氣中濃度大的組分先流出色譜柱,而在固定相中濃度大的組分后流出。


原理展示:


原理.png











檢測儀器和試劑:


Thermo Trace 1310氣相色譜質譜聯(lián)用儀,HH-4數(shù)顯恒溫水浴鍋;鹽酸、甲醇、氯仿為分析純試劑,正己烷為色譜純試劑。


脂肪酸檢測范圍:

 反式脂肪酸,混合脂肪酸,黃秋葵籽油脂肪酸,動物油脂脂肪酸,菜籽油脂肪酸,羊油脂肪酸,大豆油脂肪酸,豬油脂肪酸,芝麻油脂肪酸,樟樹油脂肪酸,飽和脂肪酸,牛油脂肪酸,白果油脂肪酸,游離脂肪酸,高級脂肪酸,乳品脂肪酸,蓖MA油脂肪酸,飼料脂肪酸,奶粉脂肪酸,短鏈脂肪酸,羥基脂肪酸等。

640 (1).png



檢測流程:

1)樣品提?。?/span>

稱取適量樣品,加入4mL的甲醇/CH2Cl2(1:3)混合溶液,搖勻;恒溫在30℃以下超聲抽提10min。取出離心管,放于離心機中離心(1800rpm,10min),收集上清液,重復3次;將萃取液在柔和氮氣流下吹干。

2)萃取液的皂化:

加入3mL 6%KOH的甲醇溶液(配制:6gKOH/甲醇118mL左右),超聲10min,放置30min,重復3次,室溫放置過夜(瓶蓋蓋緊)進行堿水解;加入2mL正己烷,超聲10min,搖勻,震蕩離心,棄除上層正己烷萃取液,重復3次。在上述萃取完剩下的溶液中(水相),加入約1mL 4N的HCl使pH<2,再用2mL正己烷萃取3次。


3)脂肪酸的衍生化:

將上述萃取液,轉移到帶蓋玻璃管中,用氮氣吹干后,加入約2mL BF3-MeOH,玻璃管上空間沖入氮氣后蓋蓋密閉,于90℃下加熱2h;待樣品冷卻后,加入5%NaCl溶液約1ml,用2ml正己烷萃取3次,并將萃取液轉移到2mL進樣瓶中,氮氣吹干,待分析。


4)色譜條件:

色譜柱:Thermo  TG-5MS 30m x 0.25mm x 0.25µm

升溫程序:80度起始溫度,保持1分鐘;10度/min升溫到200度,5度/min升溫到225度,2度/min升溫到250度,保持5min。

MS,EI源,

分流模式:不分流

scan模式

傳輸線溫度:280℃

離子源溫度:280℃

進樣口溫度:290℃

氦氣,恒流模式,流速:1 .2mL/min。

掃描范圍:30-400

進樣量:1μL。

檢出限:0.02mg/kg


圖例展示:

640 (4).png










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