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伊萊博生物科技(上海)有限公司

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Mallory染色
Mallory染色
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【簡(jiǎn)單介紹】
Mallory染色 實(shí)驗(yàn)原理:三色染色通常是指染胞核和能選擇性的顯示膠原纖維和肌纖維。該染色原理與陰離子染料分子的大小和組織滲透有關(guān):分子的大小由分子量來(lái)體現(xiàn),小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織;而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高的組織。

Mallory染色


實(shí)驗(yàn)材料

Mallory試劑盒、95%乙醇、無(wú)水乙醇、二甲苯、中性樹脂


Mallory染色過(guò)程:

1. 組織準(zhǔn)備

  • ?固定?:將組織樣本固定于10%福爾馬林固定液中,以保存其形態(tài)和化學(xué)成分。

  • ?脫水包埋?:將固定后的組織進(jìn)行常規(guī)脫水處理,然后用石蠟包埋,以便切片。

2. 切片與脫蠟

  • ?切片?:使用切片機(jī)將包埋好的組織切成4μm厚的石蠟切片。

  • ?脫蠟?:將切片置于一系列不同濃度的乙醇中,使石蠟逐漸溶解并脫去,最終將切片水化至水相。

3. 氧化與漂白

  • ?氧化?:將切片浸入酸化gaomengsuanjia溶液中氧化一定時(shí)間(通常為5分鐘),以增強(qiáng)組織的染色效果。

  • ?水洗?:用蒸餾水或自來(lái)水輕輕沖洗切片,去除殘留的gaomengsuanjia溶液。

  • ?漂白?:將切片浸入草酸溶液中漂白1~2分鐘,以去除多余的氧化產(chǎn)物,并準(zhǔn)備進(jìn)行染色。

4. 染色

  • ?PTAH染色?:將切片浸入Mallory PTAH染色液(自然氧化法)中,加蓋浸染24~48小時(shí)。此步驟是染色的核心,磷鎢酸蘇木素將與組織中的蛋白質(zhì)成分結(jié)合,形成鮮明的染色效果。

5. 分色與脫水

  • ?分色?:用95%的乙醇迅速洗去切片上多余的染液,此步驟需迅速進(jìn)行,以避免顏色過(guò)度脫失。

  • ?脫水?:將切片依次置于更高濃度的乙醇中進(jìn)行脫水處理,直至無(wú)水乙醇。

6. 透明與封固

  • ?透明?:使用二甲苯等透明劑對(duì)切片進(jìn)行透明處理,以去除切片中的乙醇并增加其透明度。

  • ?封固?:最后,用中性樹膠將切片封固在載玻片上,以便長(zhǎng)期保存和觀察。


染色結(jié)果:

Mallory染色是一種在生物化學(xué)和病理學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的染色方法,特別用于結(jié)締組織的染色。它主要用于顯示膠原纖維和其他蛋白質(zhì)成分,使得在顯微鏡下觀察時(shí),這些結(jié)構(gòu)能夠更清晰地呈現(xiàn)出來(lái)。

Mallory染色通常使用酸性品紅或天青B等酸性染料,并結(jié)合磷鎢酸或磷鉬酸等媒染劑。這些酸性染料能夠與組織中的蛋白質(zhì)成分結(jié)合,而媒染劑則能增強(qiáng)染料的染色效果,使得染色更加鮮明和持久。

通過(guò)Mallory染色,病理學(xué)家可以更容易地觀察和分析結(jié)締組織中的膠原纖維和其他蛋白質(zhì)成分,從而幫助診斷與這些結(jié)構(gòu)相關(guān)的疾病。例如,在肝臟疾病的診斷中,Mallory染色可以幫助識(shí)別肝硬化時(shí)肝小葉結(jié)構(gòu)的變化和膠原纖維的增生情況。

需要注意的是,Mallory染色是一種比較復(fù)雜的染色方法,需要經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)人員進(jìn)行操作。同時(shí),染色結(jié)果也可能受到多種因素的影響,如染液的濃度、染色時(shí)間、洗滌條件等。因此,在進(jìn)行Mallory染色時(shí),需要嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件,以確保染色結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。




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