產(chǎn)品簡介

麥胚凝集素(WGA)是一種經(jīng)過充分研究的凝集素，已知其對N-乙酰-D-氨基葡萄糖和唾液酸的結合親和力，使其成為各種生物應用中的有價值的工具。它與糖綴合物的相互作用使得WGA衍生物和綴合物能夠廣泛用于熒光成像和分析，便于標記酵母芽疤痕、纖維化疤痕組織和革蘭氏細菌和哺乳動物細胞的細胞膜。WGA特異性靶向被稱為殼糊精的β-1，4-GlcNAc連接的殘基序列。每個單體包含兩個相同的、不相互作用的結合位點，與3或4個β-1，4-GlcNAc單元互補。在測試的單糖中，只有GlcNAc顯示出與WGA的強結合，而ManNAc顯示出無結合，而GalNAc顯示出弱結合。WGA的iFluor 532綴合物具有iFluor 532染料的明亮的紅色熒光特征(Ex/Em = 537/560 nm)。值得注意的是，與Alexa Fluor 532 WGA綴合物一樣，iFluor 532 WGA綴合物保留了其結合唾液酸和N-乙酰氨基葡萄糖殘基的能力，增強了其在熒光成像和各種科學研究分析中的效用。

產(chǎn)品性質

Ex (nm)：537

Em (nm)：560

溶劑：Water

適用儀器

熒光顯微鏡  

Ex:                  Cy3/TRITC 濾波片組

Em：                   Cy3/TRITC 濾波片組

推薦孔板:                 黑色透明底板

儲備溶液配制

iFluor 532 小麥胚芽凝集素 (WGA) 綴合物儲備液 (200X)：將 500 µL ddH2O 添加到粉末小瓶中，制成 2 mg/mL 的儲備溶液。

注意：重新配制的綴合物溶液可在 2-8 °C 下短期儲存，或在 -20 °C 下長期儲存。

工作溶液配制

iFluor 532小麥胚芽凝集素 (WGA) 綴合物工作溶液 (1X)：將 5 μL 200X WGA 儲備溶液添加到 1 mL HHBS 緩沖液中。

注意：不同細胞系的優(yōu)化染色濃度可能不同。 活細胞的推薦起始濃度為 5-10 µg/mL。

操作方案

活細胞染色

1. 用 HHBS 緩沖液清洗細胞兩次。

2. 添加 100 µL iFluor 532-WGA 工作溶液。

3. 將細胞與 WGA 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 分鐘。

4. 用 HHBS 緩沖液清洗細胞兩次。

5. 使用 Cy3/TRITC 濾波片組在熒光顯微鏡上成像細胞。

固定細胞染色

1. 用含4%甲醛的PBS溶液固定細胞。

注意：對于固定細胞膜染色，建議在沒有透化步驟的情況下進行染色。固定后透化步驟會導致細胞內(nèi)區(qū)室染色，如高爾基體和內(nèi)質網(wǎng) (ER) 結構染色。

2. 添加 100 µL iFluor 532-WGA 工作溶液。

3. 在室溫下，用 WGA 工作溶液孵育細胞 10-30 分鐘。

4. 用 HHBS 緩沖液清洗細胞兩次。

5. 使用 Cy3/TRITC 濾波片組在熒光顯微鏡上成像細胞。 

運輸與保存方法

冰袋運輸。在零下15度以下保存, 避免光照。

注意事項 ：

1、該產(chǎn)品不適用于革蘭氏陰性細菌。

2、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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