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Mouse IL-5 ELISA Kit 生化試劑

參   考   價: ¥ 2100

訂  貨  量: ≥1支

具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號:AB-L205

品       牌:其他品牌

廠商性質:生產(chǎn)商

所  在  地:南京市

更新時間:2022-12-20 09:01:44瀏覽次數(shù):209

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CAS AB-L205 產(chǎn)品規(guī)格 48T
級別 超純、高純
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術。特異性抗Mouse IL-5 抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和shengwusu化的檢測抗體,經(jīng)過孵育,樣本中存在的Mouse IL-5 與固相抗體和檢測抗體結合。洗滌去除未結合的物質后,加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術。特異性抗Mouse IL-5 抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和shengwusu化的檢測抗體,經(jīng)過孵育,樣本中存在的Mouse IL-5 與固相抗體和檢測抗體結合。洗滌去除未結合的物質后,加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中Mouse IL-5 的濃度成正比。加入終止液終止反應,在 450 nm 波長(參考波長 570 - 630 nm)測定吸光度值。本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術。特異性抗Mouse IL-5 抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和shengwusu化的檢測抗體,經(jīng)過孵育,樣本中存在的Mouse IL-5 與固相抗體和檢測抗體結合。洗滌去除未結合的物質后,加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中Mouse IL-5 的濃度成正比。加入終止液終止反應,在 450 nm 波長(參考波長 570 - 630 nm)測定吸光度值。

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術。特異性抗Mouse IL-5 抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和shengwusu化的檢測抗體,經(jīng)過孵育,樣本中存在的Mouse IL-5 與固相抗體和檢測抗體結合。洗滌去除未結合的物質后,加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中Mouse IL-5 的濃度成正比。加入終止液終止反應,在 450 nm 波長(參考波長 570 - 630 nm)測定吸光度值。

樣本采集與貯存收起

1. 細胞培養(yǎng)上清

300 × g 離心 10 分鐘去除沉淀物,即刻檢測,或者分裝,-20℃以下貯存。

2. 血清樣本

離心管收集血清。血樣凝集 30 分鐘后,1,000 × g 離心 10 分鐘。吸取血清樣本之后即刻檢測,或者分裝,-20℃以下貯存。

3. 血漿樣本

EDTA、gouyuansuanna或肝素抗凝收集血漿樣本。1,000 × g 離心 30 分鐘收集樣本。即刻檢測,或者分裝,-20℃以下貯存。本試劑盒可能適用于其它生物學樣本。細胞培養(yǎng)上清、血清和血漿已經(jīng)過驗證。

試劑盒提供的材料收起

88.png

自備材料收起

1) 能夠檢測 450 nm 吸光度的酶標儀,參考波長 570 nm 或 630 nm

2) 移液器及槍頭、加樣槽

3) 準備試劑用的試管、離心管、量筒等

4) 蒸餾水或去離子水

5) 渦旋振蕩器、微孔板振蕩器



試劑準備收起

檢測前請將所有的試劑、樣本恢復至室溫(18℃-28℃)。如果濃縮的試劑出現(xiàn)結晶,37℃溫浴,直至結晶全部溶解。

1×洗液

吸取 20×濃縮洗液 50 ml 至 1 L 的量筒,加蒸餾水至 1,000 ml,輕輕混勻,避免泡沫。轉移至干凈瓶內。2 - 25℃貯存,1×洗液可穩(wěn)定保存 30 天。

1×檢測緩沖液

吸取 10×濃縮檢測緩沖液 5 ml 至 100 ml 量筒,加蒸餾水至 50 ml,輕輕混勻,避免泡沫。2 - 8℃貯存,1×檢測緩沖液可穩(wěn)定保存 30 天。

試劑盒保存于 2 - 8℃,有效期標注于標簽上。

技術要點收起

1) 重溶或者混合蛋白的時候,始終避免氣泡產(chǎn)生。

2) 避免交叉污染,在進行標準品加樣、樣本加樣,以及不同試劑加樣的時候,請更換槍頭。不同的試劑,使用不同的加樣槽。

3) 在應用自動洗板機時,加入洗液之后,設置 30 秒的浸泡程序,或者在不同的洗滌步驟將微孔板掉轉 180 度,這樣可以提高分析的準確度。

4) 為保證結果的精確性,孵育時封好封板膜。

5) 顯色底物在添加之前應是無色的。保持顯色底物始終處于避光態(tài)。

6) 終止液的添加順序應與顯色底物的添加順序相同。

添加終止液之后,底物的顏色應由藍色轉變?yōu)辄S色。如果底物呈現(xiàn)綠色,說明終止液與顯色底物沒有充分混勻。

7) 推薦所有的檢測樣本和標準品在檢測中設復孔。

8) 在任何情況下,避免接觸微孔板的內表面。

操作步驟收起

檢測之前請將所有的試劑、樣本平衡至室溫(18℃-28℃)。

1) 準備好所有需要的試劑及工作濃度標準品。

2) 將不需要的板條拆卸下來,放回裝有干燥劑的鋁箔袋,重新封好封口。

3) 浸泡酶標板:加入300 μl 1×洗液靜置浸泡30 秒。為了獲得理想的實驗結果浸泡是必須的。棄掉洗液之后,在吸水紙上將微孔板拍干。洗板完成之后,請立即使用微孔板,不要讓微孔板干燥。

4) 加標準品:標準品孔加入 100 μl 2 倍倍比稀釋的標準品??瞻卓准尤?100 μl 標準品稀釋液(血清/血漿樣本)或培養(yǎng)基(細胞培養(yǎng)上清樣本)。

5) 加樣本:血清/血漿:樣本孔加入 50μl 1×檢測緩沖液和 50μl 樣本。 細胞培養(yǎng)上清:樣本孔加入 100 μl 細胞培養(yǎng)上清。

6) 加檢測抗體:每孔加入50 μl 稀釋的檢測抗體(1:100 稀釋)。保證步驟4、5、6 連續(xù)加樣,不要間斷。加樣過程在15 分鐘內完成。

7) 孵育:使用封板膜封板。300 轉/分鐘振蕩,室溫(18℃-28℃)孵育 2 小時。

8) 洗滌:棄掉液體,每孔加入 300 μl 洗液洗板,洗滌 6 次。每次洗板,在吸水紙上拍干。為獲得理想的實驗性能,必須chedi移除殘留液體。

9) 加酶:每孔加入 100 μl 稀釋的辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(1:100 稀釋)。

10) 孵育:使用新的封板膜封板。300 轉/分鐘振蕩,室溫(18℃-28℃)孵育 45 分鐘。

11) 洗滌:重復步驟 8。

12) 加底物顯色:每孔加入 100 μl 顯色底物 TMB,避光,室溫(18℃-28℃)孵育 5 - 30 分鐘。

13) 加終止液:每孔加入 100 μl 終止液。顏色由藍色變?yōu)辄S色。如果顏色呈現(xiàn)綠色或者顏色的變化明顯不均勻,請輕輕叩擊板框,充分混勻。

14) 檢測讀數(shù):在 30 分鐘之內,使用酶標儀進行雙波長檢測,測定 450 nm 最大吸收波長和 570 nm 或 630 nm 參考波長下的OD 值。校準后的OD 值為 450 nm 的測定值減去 570 nm 或 630 nm 的測定值。僅使用 450 nm 測定會導致OD 值偏高,并且準確度降低。

結果計算收起

90.png

試劑盒性能收起

1) 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值,大于等于0.99;

2) 靈敏度:zuidi檢測濃度小于50pg/mL;

3) 特異性:不與其他可溶性結構類似物交叉反應;

4) 重復性:板內變異系數(shù)小于10%、板間變異系數(shù)小于15%;

5) 貯藏:2-8°C,遊光防潮保存;

6) 有效期:6個月。


高濃度低生長因子基質膠

高濃度低生長因子基質膠 是一種可溶性的基底膜基質膠

高濃度低生長因子基質膠

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低生長因子基質膠

低生長因子基質膠是一種可溶性的基底膜基質膠,這種基

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