免疫原

重組PaO基因來自擬南芥Q9FYC2, At3g44880

主機(jī)的兔子

單克隆多克隆

純度血清

格式凍干

量50µl

重建時加入無菌水50µl

凍干/復(fù)配保存于-20°C;一旦重組，就進(jìn)行分配，以避免反復(fù)的凍融循環(huán)。請記住旋轉(zhuǎn)管簡單之前，打開他們，以避免任何損失，可能發(fā)生的材料粘附到帽或管的側(cè)面。

Western blot (WB)

推薦稀釋倍數(shù):5000 (WB)

預(yù)期|明顯MW

61 | 54 kDa

野生生態(tài)型哥倫比亞擬南芥(Arabidopsis thaliana Columbia)在連續(xù)光照條件下生長4周，然后轉(zhuǎn)到*黑暗條件下生長5天。幾片樹葉從植物收割前轉(zhuǎn)移到黑暗(0 d)或之后他們保持五天(5 d)。蛋白質(zhì)提取與SDS提取解決方案包含50毫米三(pH值6.8),10% (w / v)甘油,2% (w / v) SDS和6% (v / v) 2-mercaptoethanol。將相當(dāng)于1mg葉片材料的蛋白提取液裝載，在14% SDS-PAGE上分離，與PVDF印跡1h。用含1.5%脫脂牛奶的PBS-T在室溫(RT)攪拌下阻斷印跡1h。印跡與一抗中稀釋1:10 000，在RT中攪拌1h。倒出抗體溶液，將印跡簡單沖洗兩次，然后在PBS-T中沖洗一次15分鐘，攪拌3次5分鐘。印跡用二抗(抗兔IgG，馬蘿卜過氧化物酶標(biāo)記，來自GE Healthcare)稀釋至1:20 000，在室溫下攪拌1h。按照上述方法洗滌印跡，并根據(jù)制造商的說明，使用ECLplus沖洗1分鐘。曝光時間為5min。