產(chǎn)品描述:

本制品是spCas9 Nuclease的一個(gè)突變體。Cas9 Nuclease具有兩個(gè)切割活性中心，從而實(shí)現(xiàn)在sgRNA靶序列特定位點(diǎn)引入DNA雙鏈斷裂（DSB）。Cas9 D10A Nickase在Cas9    Nuclease基礎(chǔ)上突變其中一個(gè)切割活性中心，其能在與sgRNA靶序列互補(bǔ)的DNA鏈上產(chǎn)生切口，從而形成功能性的單鏈斷裂。Cas9 D10A Nickase配合一對(duì)gRNA使用，可實(shí)現(xiàn)Cas9 Nuclease相同的基因編輯效果，由于有效的識(shí)別序列由20 bp增加至40 bp，可明顯減少意外的脫靶基因修飾，從而顯著提高CRISPR/Cas9技術(shù)基因修飾的特異性。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

純蛋白體系，避免CRISPR基因敲除時(shí)引入質(zhì)粒或病毒干擾；

可顯著降低脫靶效應(yīng)。

產(chǎn)品用途：

基于蛋白與sgRNA轉(zhuǎn)染的非病毒載體CRISPR基因敲除；

基于蛋白與sgRNA轉(zhuǎn)染的非病毒載體CRISPR基因敲入；

sgRNA剪切靶點(diǎn)DNA效率檢測(cè)，降低體內(nèi)篩選成本；

體外剪切靶DNA的特異位點(diǎn)。

保存溫度：

-20℃保存，或-80℃長期保存。

應(yīng)用實(shí)例：

Cas9 D10A Nickase DNA切割活性檢測(cè)：

帶有靶位點(diǎn)的超螺旋DNA（cccDNA）；

酶切產(chǎn)生切刻后的開環(huán)DNA（ocDNA）；

50 -100 ng酶可有效切割cccDNA（>95%）