免疫原

klh偶聯(lián)肽來自擬南芥P06525, At1g77120等ADH序列

主機(jī)的兔子

單克隆多克隆

純度血清

格式凍干

數(shù)量100µl

復(fù)配時，加入100µl無菌水

-20°C保存凍干/重組;一旦重組，使公平，以避免重復(fù)凍融循環(huán)，請記住，在打開之前，旋轉(zhuǎn)管短暫，以避免任何損失，凍干材料粘附在瓶蓋或管的兩側(cè)

Western blot (WB)

推薦稀釋倍數(shù):3000 (WB)

預(yù)期|表觀MW

42 | 42 kDa(擬南芥)

利用SDS Extraction Buffer (60mM Tris-HCl pH 8.0, 2% SDS, 1.5%蔗糖)提取WT Col-0和adh突變體(缺氧處理0-4-8小時)的擬南芥幼苗，采用XT CRITERION 10%Bis-Tris (BioRad) SDS- page法分離總蛋白20 g，并印跡1h至PVDF。在室溫(RT)攪拌下，用TBS-T浸泡牛奶1h，立即阻斷印跡。用抗adh抗體在TBS-T中稀釋為1:3 000的牛奶中孵育3小時，攪拌。將二抗(從Agrisera偶聯(lián)的山羊抗兔HRP IgG, AS09 602)在牛奶中稀釋為1:20 000，在TBS-T中RT孵育50分鐘，然后按上述方法洗滌，用化學(xué)發(fā)光檢測試劑孵育2分鐘。使用生物光譜AC成像系統(tǒng)(UVP)獲得印跡圖像。暴露時間為10min，箭頭表示ADH (42kDa，預(yù)期)。擬南芥在50 ~ 70 kDa之間存在一條交叉反應(yīng)帶。膜右下角的大條帶很可能是染色物。