擬南植物中重組actin的100個(gè)氨基酸保守率超過80%:actin-1 P0CJ46 AT2G37620、actin-2 Q96292 AT3G18780、actin-3 P0CJ47AT3G53750、actin-4 P53494 AT5G59370、actin-5 Q8RYC2 At2g42100、actin-7 Q96293 At5g09810、actin-8 Q96293 AT1G49240、actin-11 P53496、AT3G12110、actin-12 P53497 AT3G46520

主機(jī)的鼠標(biāo)

單克隆重組

子類/同形像IgG1

親和純化，PBS pH 7.4

格式凍干

數(shù)量10µg

用10µl無菌或去離子水進(jìn)行重組。

存儲(chǔ)

-20°C保存凍干/重組;一旦重組，就分成等分，以避免反復(fù)的凍融循環(huán)。請(qǐng)記住，在打開管之前，要簡(jiǎn)短地旋轉(zhuǎn)管，以避免任何損失，可能發(fā)生的凍干材料粘附在帽或管的側(cè)面。

Western blot (WB)

推薦稀釋倍數(shù)1:1000 1:5000 (WB)

預(yù)期|表觀MW 41.6 | 45 kDa

新鮮從擬南芥葉片組織中提取總蛋白10µg/孔。圖中顯示的所有通道均來自于同時(shí)提取的不同擬南芥葉片樣本。新鮮葉片組織直接在1x Bolt LDS加載緩沖液(Thermo)和200mM DTT中研磨，在80°C變性10分鐘。樣品在12%的SDS-PAGE凝膠上分離，在100V下濕轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)移到硝化纖維素上1小時(shí)。用5%牛奶在TBST中攪拌，1h/RT阻斷印跡。印跡與Agrisera Mouse anti-actin單克隆抗體(AS21 4615)以1:1000稀釋，在5%牛奶中攪拌1h rt。印跡在TBS-T中攪拌沖洗3次，共5分鐘。然后將膜與二級(jí)抗小鼠HRP (Agrisera AS09 627)以1:10 000稀釋的牛奶在室溫下孵育1小時(shí)。按上述方法洗滌印跡，使用ECL試劑并按照制造商的建議觀察反應(yīng)。在膠片曝光15秒后，肌動(dòng)蛋白帶可見。