運輸和儲存
-20 ℃儲存,干冰運輸
Matrigel 基質(zhì)會有色差變化,是由于酚紅和碳酸氫鹽與 CO2作用引起的,但是與 5% CO2平衡后色差即會減少 。
MatrigelTM 基本操作
薄膠成膠方法
凍融后,用預(yù)冷的移液槍頭混勻 MatrigelTM 基質(zhì)成勻漿狀
將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上,加入濃度為 50 μ L/cm 生長面積的 Matrigel 基質(zhì)在 37 ℃放置 30 分鐘,即可使用
厚膠成膠方法
凍融后,用預(yù)冷的移液槍頭混勻 MatrigelTM 基質(zhì)成勻漿狀。
將需要使用的培養(yǎng)板置于冰浴,將培養(yǎng)的細(xì)胞與 MatrigelTM 基質(zhì)混合,用移液槍頭使其懸浮于基質(zhì)中。加入濃度為 150 - 200 μ L/cm 生長面積的 Matrigel 基質(zhì)
在 37 ℃放置 30 分鐘,可成膠??梢约尤爰?xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì),也可使細(xì)胞直接生長在膠表面
薄層包被方法
凍融后,用預(yù)冷的移液槍頭混勻 Matrigel 基質(zhì)成勻漿狀。
根據(jù)使用需要,采用無血清培養(yǎng)基稀釋 Matrigel 基質(zhì)。根據(jù)實驗需要確定最佳包被濃度。
將稀釋的 Matrigel 基質(zhì)包被于所需的培養(yǎng)器皿中,包被量至少覆蓋整個器皿的生長表面。室溫下孵育 1 小時。
去除未結(jié)合的 Matrigel ,用無血清培養(yǎng)基輕輕地沖洗