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南京沃博生物科技有限公司

當(dāng)前位置:南京沃博生物科技有限公司>>生化試劑>>常用試劑>>LX8801Phalloidin-iFluor™ 594 Conjugate

Phalloidin-iFluor™ 594 Conjugate

參   考   價(jià): ¥ 2000

訂  貨  量: ≥1支

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號:LX8801

品       牌:南京沃博生物科技有限公司

廠商性質(zhì):生產(chǎn)商

所  在  地:南京市

更新時(shí)間:2021-09-16 17:35:16瀏覽次數(shù):192

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分類 其他 級別 超純、高純
鬼筆環(huán)肽Phalloidin是一種雙環(huán)肽,當(dāng)與熒光染料偶聯(lián)時(shí),可用于標(biāo)記固定和透化細(xì)胞中的肌動(dòng)蛋白actin。鬼筆環(huán)肽Phalloidin與 Alexa Fluor 染料的熒光偶聯(lián)物是大多數(shù)應(yīng)用的 F-actin染料,因?yàn)樗鼈冊谡麄€(gè)光譜范圍內(nèi)都具有明亮的信號和光穩(wěn)定性.

產(chǎn)品信息


貨號

名稱

規(guī)格

價(jià)格/

LX8801

Phalloidin-iFluor™ 594 Conjugate鬼筆環(huán)肽-iFluor™ 594

300T

2006.4


產(chǎn)品簡介

鬼筆環(huán)肽(Phalloidin)的結(jié)合阻止絲狀肌動(dòng)蛋白(微絲)的解離,穩(wěn)定微絲結(jié)構(gòu),從而破壞微絲的聚合-去聚合的動(dòng)態(tài)平衡。此特性使得肌動(dòng)蛋白聚合發(fā)生的臨界濃度(CC)降至<1µg/mL,因此,可用作一種聚合促進(jìn)劑。此外,鬼筆環(huán)肽還可抑制F-actin的ATP水解活性。

本品為鬼筆環(huán)肽-iFluor 594標(biāo)記探針會(huì)選擇性地結(jié)合F-肌動(dòng)蛋白。以納摩爾濃度使用,鬼筆環(huán)肽衍生物是方便的探針,用于標(biāo)記,鑒定和定量甲醛固定和透化組織切片中的F-肌動(dòng)蛋白,細(xì)胞培養(yǎng)物或無細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。肌動(dòng)蛋白是一種球狀的,大約42kDa的蛋白質(zhì),幾乎存在于所有真核細(xì)胞中。 它也是最高度保守的蛋白質(zhì)之一,與藻類和人類不同的物種相差不超過20%。 肌動(dòng)蛋白是細(xì)胞中兩種細(xì)絲的單體亞基:微絲,細(xì)胞骨架的三個(gè)主要組分之一,以及微絲,是肌細(xì)胞中收縮裝置的一部分。 因此,肌動(dòng)蛋白參與許多重要的細(xì)胞過程,包括肌肉收縮,細(xì)胞運(yùn)動(dòng),細(xì)胞分裂和胞質(zhì)分裂,囊泡和細(xì)胞器運(yùn)動(dòng),細(xì)胞信號傳導(dǎo),以及細(xì)胞連接和細(xì)胞形狀的建立和維持。

本品以1000×儲(chǔ)存液形式(溶于DMSO)提供,按照100µl/孔(96孔板),總共可做300T。

注意事項(xiàng):   

鬼筆環(huán)肽  的分子量小,很容易通過細(xì)胞,不需要對細(xì)胞進(jìn)行冷丙酮和TRITON X-100處理。毒性較大,戴上手套操作。

有幾種方法都能用來染色組織細(xì)胞培養(yǎng)物內(nèi)的肌動(dòng)蛋白絲(F-actin)染色,其中,固定步驟在獲得可信且具代表性的細(xì)胞F-actin分布情況中至關(guān)重要。固定步驟基于實(shí)驗(yàn)自身需求來選擇。多聚甲醛或戊二醛都能得到優(yōu)秀的F-actin染色和良好的板狀偽足維持保存。

一、實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備

1.1 iFluor 594 Phalloidin(貨號 LX8801)

1.2 1×PBS Buffer(pH 7.4), for Cell Culture(貨號 SH30256.01)

1.3 固定液(溶于PBS的4%多聚甲醛,pH 7.0)

1.4 破膜液(溶于PBS的0.5% Triton X-100)

1.5 (可選)抗熒光淬滅劑

1.6 (可選)即用型PI染色液(貨號 4209)

1.7 (可選)BSA, Standard Grade(貨號 J8660)

1.8 黑框/透明底的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板

二、染色工作液準(zhǔn)備

2.1 于實(shí)驗(yàn)前將低溫保存的iFluor 594Phalloidin置于室溫回溫至少20min,低速離心后才開瓶。第一次使用請將本品按照單次用量進(jìn)行分裝,置于-20℃避光保存,一年穩(wěn)定。

2.2 本品以1000×DMSO儲(chǔ)存液形式提供。開始實(shí)驗(yàn)前,使用1×PBS Buffer(pH 7.4)將其稀釋到1×染色工作液(比如1µl儲(chǔ)存液加入1ml PBS Buffer),用槍吹勻即可。

【注①】:以96孔板為檢測體系,按照100µl/孔來計(jì)算,準(zhǔn)備足量的染色工作液;也可對細(xì)胞爬片進(jìn)行染色,但需調(diào)整染色工作液的用量,以能覆蓋住細(xì)胞為準(zhǔn)。

【注②】:最佳的工作濃度和孵育時(shí)間取決于特定的應(yīng)用。根據(jù)特定的細(xì)胞類型和/或細(xì)胞/組織對探針的通透性來調(diào)整合適的染色條件。

【注③】:可使用含1% BSA的PBS Buffer稀釋儲(chǔ)存液,能夠降低非特異背景染色,也能最小化鬼筆環(huán)肽粘附到管壁的可能性。

【注④】:染色工作液現(xiàn)配現(xiàn)用,室溫避光保存。

三、染色流程(以96孔板為例)

3.1 用黑框/透明底的96孔板進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),使其貼壁生長達(dá)到70-80%的匯合度。

3.2 吸掉培養(yǎng)液,用37℃預(yù)熱的1×PBS Buffer(pH 7.4)清洗細(xì)胞2次。

3.3 用溶于PBS的4%多聚甲醛固定細(xì)胞,室溫固定10-30min?!咀⒁狻浚汗潭ㄟ^程中甲醇能破壞肌動(dòng)蛋白,因此,固定液中最好避免接觸任何甲醇。固定液是無甲醇的甲醛。

3.4 用1×PBS Buffer清洗細(xì)胞2-3次,室溫下30s/次。

3.5 用破膜緩沖液透化細(xì)胞,室溫處理5min。

3.6 用1×PBS Buffer清洗細(xì)胞2-3次,室溫下30s/次。

3.7 取100μl現(xiàn)配的iFluor 594Phalloidin染色工作液到每個(gè)孔內(nèi),室溫避光孵育30-90min。

【注意】:若有需要,此時(shí)可加入即用型PI染色液或其他不同于iFluor 594熒光光譜的細(xì)胞核染色液。

3.8 用1×PBS Buffer清洗細(xì)胞2-3次,室溫下30s/次。

3.9 加抗熒光淬滅劑(如Fluoromount-GTM)到孔內(nèi)保護(hù)熒光。

3.10 熒光顯微鏡下觀察染色結(jié)果,選擇iFluor 594激發(fā)/發(fā)射濾片(Ex/Em=590/618nm)。若做細(xì)胞核染色,選擇合適濾片,比如PI激發(fā)/發(fā)射濾片(Ex/Em=364/454nm)。

相關(guān)產(chǎn)品:

貨號

名稱

規(guī)格

價(jià)格/

LX4520

FITC-Phalloidin  FITC-鬼筆環(huán)肽

300T

2006.4

LX2226

FITC-Phalloidin  FITC-鬼筆環(huán)肽

1mg

5199

LX4530

Phalloidin-Tetramethylrhodamine Conjugate TRITC-鬼筆環(huán)肽

300T

2006.4

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鬼筆環(huán)肽-加州紅 Phalloidin-California Red Conjugate

300T

2006.4

LX3801

鬼筆環(huán)肽-iFluor™ 350 Phalloidin-iFluor™ 350 Conjugate

300T

2006.4

LX4801

鬼筆環(huán)肽-iFluor™ 405 Phalloidin-iFluor™ 405 Conjugate

300T

2006.4

LX6801

鬼筆環(huán)肽-iFluor™ 514  Phalloidin-iFluor™ 514 Conjugate

300T

2006.4

LX7801

鬼筆環(huán)肽-iFluor™ 532 Phalloidin-iFluor™ 532 Conjugate

300T

2006.4

LX1710

鬼筆環(huán)肽-iFluor™ 633  Phalloidin-iFluor™ 633 Conjugate

300T

2006.4

LX2711

鬼筆環(huán)肽-iFluor™ 647 Phalloidin-iFluor™ 647 Conjugate

300T

2006.4

LX3712

鬼筆環(huán)肽-iFluor™ 680  Phalloidin-iFluor™ 680 Conjugate

300T

4092

LX4713

鬼筆環(huán)肽-iFluor™ 700  Phalloidin-iFluor™ 700 Conjugate

300T

4092

LX5714

鬼筆環(huán)肽-iFluor™ 750  Phalloidin-iFluor™ 750 Conjugate

300T

4092

LX5715

鬼筆環(huán)肽-iFluor™ 790  Phalloidin-iFluor™ 790 Conjugate

300T

4092

LX8717

鬼筆環(huán)肽-AF350 AF350 Phalloidin

300T

4092

LX1610

鬼筆環(huán)肽-AF488 AF488 Phalloidin

300T

4092

LX2610

鬼筆環(huán)肽-AF594AF594 Phalloidin

300T

4092

LX0226

Amino-Phalloidin 氨基鬼筆環(huán)肽

1mg

6199

LX1801

iFluor 488 phalloidin iFluor 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(綠色)

300T

1857

LX2801

iFluor 555 phalloidin iFluor 555標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(橘色)

300T

1857

LX2800

Phalloidin 鬼筆環(huán)肽

1MG

5299



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