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超氧化物歧化酶（SOD）是一類催化超氧化物歧化為氧氣和過氧化氫的酶。超氧化物是細(xì)胞中主要的活性氧之一。它是與神經(jīng)退行性疾病，局部缺血再灌注損傷，動脈粥樣硬化和衰老相關(guān)的病理學(xué)的主要貢獻(xiàn)者。在幾乎所有暴露于超氧自由基的細(xì)胞中，SOD都是重要的抗氧化劑防御措施。實(shí)際上，缺乏SOD1的小鼠會出現(xiàn)多種病理，包括肝細(xì)胞癌，與年齡有關(guān)的肌肉質(zhì)量損失加速，白內(nèi)障較早發(fā)生和壽命縮短。SOD的過表達(dá)保護(hù)鼠類纖維肉瘤細(xì)胞免于凋亡并促進(jìn)細(xì)胞分化。Amplite™比色超氧化物歧化酶（SOD）分析試劑盒提供了一種快速靈敏的方法來測量溶液中的SOD活性。在測定中，huangpiaoling被huangpiaoling氧化酶（XO）轉(zhuǎn)化為超氧自由基離子，尿酸和過氧化氫。超氧化物與SOD Orange™反應(yīng)生成吸收約560 nm的產(chǎn)物。SOD抑制了SOD Orange™與超氧化物的反應(yīng)，因此降低了560 nm處的吸收。SOD Orange™在560 nm處的吸收下降與SOD活性成正比。該試劑盒可以方便的96孔或384孔微量滴定板形式進(jìn)行。超氧化物與SOD Orange™反應(yīng)生成吸收約560 nm的產(chǎn)物。SOD抑制了SOD Orange™與超氧化物的反應(yīng)，因此降低了560 nm處的吸收。SOD Orange™在560 nm處的吸收下降與SOD活性成正比。該試劑盒可以方便的96孔或384孔微量滴定板形式進(jìn)行。超氧化物與SOD Orange™反應(yīng)生成吸收約560 nm的產(chǎn)物。SOD抑制了SOD Orange™與超氧化物的反應(yīng)，因此降低了560 nm處的吸收。SOD Orange™在560 nm處的吸收下降與SOD活性成正比。該試劑盒可以方便的96孔或384孔微量滴定板形式進(jìn)行。
| 吸光度酶標(biāo)儀 | |
| 吸光度 | 560納米 |
| 推薦板 | 清除底部 |
| 組件A：ReadiView™SOD560 | 2瓶 |
| 成分B：50Xhuangpiaoling | 1小瓶（100 µL） |
| 組分C：huangpiaoling氧化酶 | 2個小瓶 |
| 組件D：SOD標(biāo)準(zhǔn) | 1瓶（500單位） |
| 成分E：測定緩沖液 | 1瓶（20毫升） |
準(zhǔn)備SOD標(biāo)準(zhǔn)品或測試樣品（50 µL）
添加SOD工作溶液1（25 µL）
添加SOD工作溶液2（25 µL）
在室溫下孵育30-60分鐘
監(jiān)控560 nm處的吸光度
重要說明
開始實(shí)驗(yàn)之前，請?jiān)谑覝叵陆鈨鏊性噭┖薪M件。
儲備溶液的制備
除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲存在-20°C下。避免重復(fù)凍融循環(huán)。
1. SOD標(biāo)準(zhǔn)溶液（10 kU / mL）：
將50 µL測定緩沖液（組分E）加入小瓶SOD標(biāo)準(zhǔn)液（組分D）中，制成10 kU / mL標(biāo)準(zhǔn)溶液。
為了方便起見，請使用我們的系列稀釋計
將10 µL的10 kU / mL SOD標(biāo)準(zhǔn)溶液添加到990 µL的測定緩沖液（組分E）中，以獲得100 U / mL的SOD標(biāo)準(zhǔn)溶液（SD7）。取100 U / mL SOD標(biāo)準(zhǔn)溶液（SD7），并在測定緩沖液（E組份）中以1:10進(jìn)行操作，以獲得10 U / mL SOD標(biāo)準(zhǔn)溶液（SD6）。取10 U / mL標(biāo)準(zhǔn)溶液（SD6）并進(jìn)行1：3連續(xù)稀釋，以使用測定緩沖液（組分E）獲得連續(xù)稀釋的SOD標(biāo)準(zhǔn)液（SD5-SD1）。
準(zhǔn)備工作溶液
1. SOD工作溶液1：
將2.5 mL測定緩沖液（組分E）添加到ReadiView TM SOD560 瓶（組分A）中并充分混合。然后將50μL的50Xhuangpiaoling（組分B）加到該瓶中制成SOD工作溶液1。 注意： 該SOD工作溶液1應(yīng)在實(shí)驗(yàn)前制備，并避光。SOD工作溶液1不穩(wěn)定，應(yīng)丟棄未使用的部分。
2. SOD工作溶液2：
將50μL分析緩沖液（組分E）添加到小瓶huangpiaoling氧化酶（組分C）中并充分混合。然后，將50μLhuangpiaoling氧化酶原液轉(zhuǎn)移到2.5 mL測定緩沖液（組分E）中制成SOD工作液2。
程序
表1. 在透明的底部96孔微孔板中的SOD標(biāo)準(zhǔn)品和測試樣品的布局。SD = SOD標(biāo)準(zhǔn)品（SD1-SD7，0.041至100 U / mL）; BL =空白控件；TS =測試樣品。
| BL | BL | TS | TS |
| SD1 | SD1 | ... | ... |
| SD2 | SD2 | ... | ... |
| SD3 | SD3 | ||
| SD4 | SD4 | ||
| SD5 | SD5 | ||
| SD6 | SD6 | ||
| SD7 | SD7 |
表2. 每個孔的試劑組成。
| 好 | 體積 | 試劑 |
| SD1-SD7 | 50微升 | 連續(xù)稀釋（0.041至100 U / mL） |
| BL | 50微升 | 分析緩沖液（組分E） |
| TS | 50微升 | 測試樣本 |
根據(jù)表1和表2提供的布局，準(zhǔn)備SOD標(biāo)準(zhǔn)液（SD），空白對照（BL）和測試樣品（TS）。對于384孔板，每孔使用25 µL試劑代替50 µL。
將25 µL SOD工作溶液1加入到SOD標(biāo)準(zhǔn)品，空白對照和測試樣品的每個孔中，以使總測定體積為75 µL /孔。對于384孔板，將12.5 µL SOD工作溶液1加到每個孔中，總體積為37.5 µL /孔。
將25 µL SOD工作溶液2加入到SOD標(biāo)準(zhǔn)液，空白對照和測試樣品的每個孔中，以使總測定體積為100 µL /孔。對于384孔板，向每個孔中添加12.5 µL SOD工作溶液2，總體積為50 µL /孔。
避光保存，室溫下孵育反應(yīng)30至60分鐘。
使用吸光度板讀數(shù)器在550至560 nm處監(jiān)測吸光度。
11306 Amplite™熒光法過氧化氫酶檢測試劑盒 *紅色熒光* Amplite™ Fluorimetric Catalase Assay Kit *Red Fluorescence* 1 kit 11307 Amplite™比色法huangpiaoling氧化酶檢測試劑盒 Amplite™ Colorimetric Xanthine Oxidase Assay Kit 1 kit 11308 Amplite™比色超氧化物歧化酶（SOD）檢測試劑盒*增強(qiáng)靈敏度* Amplite™ Colorimetric Superoxide Dismutase (SOD) Assay Kit *Enhanced Sensitivity* 200 Tests 11400 Amplite™比色法乙酰danjian酯酶檢測試劑盒 Amplite™ Colorimetric Acetylcholinesterase Assay Kit 1 kit
