雙丙氨膦(Bialaphos,也稱為Bilanafos)是由幾種土壤鏈霉菌代謝產(chǎn)生的一種天然有機磷三肽抗生素,結(jié)構(gòu)上由兩個L-bingansuan殘基和一個guansuan類似物草丁膦(phosphinothricin,PPT;也稱為glufosinate)組成。一旦進入正常細胞(不含抗性基因),其內(nèi)的肽酶水解雙丙氨膦,釋放草丁膦化合物,從而抑制正常氮代謝和導致胞內(nèi)氨累積,破壞guanxianan合成酶(glutamine synthetase,GS)相關的各種代謝活動,zui終殺死細胞。雙丙氨膦不僅是一種廣譜除草劑,還能強效抑制革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌、和一些真菌類植物 病原菌生長。
產(chǎn)品應用:
植物基因工程研究(篩選標志)作用機理:雙丙氨膦可用在許多植物物種(包括小麥,大麥,黑麥,燕麥,水稻和玉米)的轉(zhuǎn)化實驗,用來篩選含bar基因(from Streptomyces hygroscopicus)或pat基因(from Streptomyces viridochromeogenes)的轉(zhuǎn)基因工程細胞系,這兩種基因都能編碼草丁膦N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(phosphinothricin N-acetyltransferase),使其轉(zhuǎn)化成為一種無GS抑制活性的化合物,從而使得細胞對雙丙氨膦和草丁膦產(chǎn)生抗性。轉(zhuǎn)基因玉米研究,雙丙氨膦比草銨膦的活性更強;轉(zhuǎn)基因小麥研究,雙丙氨膦是zui可靠的選擇標準;酵母基因工程中,雙丙氨膦逐漸成為重要的選擇標準。
產(chǎn)品性質(zhì)
中文別名(Chinese Synonym):雙丙氨膦
英文別名(English Synonym) :Bialaphos,也稱為Bilanafos
CAS號(CAS NO.) :71048-99-2
分子式(Formula) :C11H21N3O6P·Na
分子量(Molecular weight) :345.26 g/mol
外觀(Appearance) :白色或淺棕色結(jié)晶性粉末
溶解性(Solubility) :溶于水(10mg/ml)
應用案例【轉(zhuǎn)基因的小麥幼胚/愈傷組織篩選】(僅作參考):
1)使用草銨膦(PPT)或雙丙氨膦進行轉(zhuǎn)化細胞的篩選;
2)粒子轟擊(bombardment)后將未成熟幼胚逐個轉(zhuǎn)移到E3培養(yǎng)基,維持培養(yǎng)7-14天;
3)胚胎轉(zhuǎn)移到含5µg/ml PPT(或雙丙氨膦)的MSCB5培養(yǎng)基(*輪篩選用培養(yǎng)基),黑暗培養(yǎng)2周;于這2周內(nèi)不能正常生長的愈傷組織直接扔棄。
4)用解剖刀將在MSCB5培養(yǎng)基上增殖的細胞簇解離,亞克隆,轉(zhuǎn)移到含有10 µg/ml PPT(或雙丙氨膦)的MSCB10培養(yǎng)基,維持培養(yǎng)4周。
5)在含5µg/ml或10µg/ml PPT(或雙丙氨膦)的培養(yǎng)基上篩選過程的持續(xù)周期約為50-75天。將所有培養(yǎng)物放到植物生長培養(yǎng)箱內(nèi),設置25 °C,黑暗培養(yǎng)。每一個轉(zhuǎn)基因愈傷組織在含有篩選標志的培養(yǎng)基上zui終生長為大量的胚性愈傷組織。
6)設置1-10µg/ml PPT(或雙丙氨膦)的梯度濃度來測試未轉(zhuǎn)化愈傷組織,以建立更加有效的篩選系統(tǒng)。每一次實驗大概準備20個目標培養(yǎng)平板。2個為對照,1個在N6C1上生長以監(jiān)測培養(yǎng)物的健康情況,另1個在含5-10µg/ml雙丙氨膦的N6C1上生長以驗證未轉(zhuǎn)化細胞對選擇標志的反應。
【注意】:轉(zhuǎn)基因小麥愈傷組織的選擇實驗中雙丙氨膦是有效的篩選標志,然而雙丙氨膦不能殺死未轉(zhuǎn)化細胞。為了得到理想的篩選效果,建議低密度(大概每個平板上10個未成熟幼胚)亞培養(yǎng)粒子轟擊后的細胞。
運輸和保存方法
-20℃長期保存,冰袋運輸。
注意事項
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
相關產(chǎn)品:
貨號 | 產(chǎn)品 | 規(guī)格 | |
M2281 | 草銨膦 Glufosinate Ammonium | 100mg/1g | 480/2800 |
M5509-1g | 乙酰丁香酮 AS | 1g | 360 |
M0461-100mg | X-Gluc | 100mg | 480 |
M5831-250mg | X-α-Gal | 250mg | 2199 |
M0943 | 潮霉素B Hyaromycin B | 1g | 650 |
S2705 | MUG 4-甲基傘型酮-beta-D-葡糖苷酸 | 250mg | 680 |
M7269-5mg | rac-GR24 獨腳金內(nèi)酯 strigolactone | 5MG | 2658 |