WarRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000×in Water)
— EB核酸染料的無(wú)毒替代品
產(chǎn)品信息
貨號(hào) | 名稱(chēng) | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
M0754 | WarRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000×in Water)WarRed 核酸染料(10,000×水溶液) | 500μl | 448 |
M0754-R | WarRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000×in Water)WarRed 核酸染料(10,000×水溶液) | 10*500μl | 4000 |
產(chǎn)品描述
WarRed是一種*的油性大分子,不能穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。不易揮發(fā)升華,人體不會(huì)吸入。艾姆斯氏測(cè)試結(jié)果也表明WarRed在凝膠染色濃度下*無(wú)誘變性,相對(duì)于EB的強(qiáng)致癌性是一種安全無(wú)毒的核酸染料。WarRed與EB具有相同的光譜特性,無(wú)需改變?yōu)V光片及觀察裝置(普通紫外凝膠透射儀),在300nm處紫外光激發(fā)檢測(cè)即可。WarRed適用于瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠電泳中的dsDNA,ssDNA以及RNA染色,可以選擇膠染法或泡染法進(jìn)行染色,使用非常方便和靈活。
使用方法
一、膠染法(同EB,電泳前染色)
1) 制膠時(shí)加入WarRed 核酸染料(每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL WarRed10,000×水溶液)。
2) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
注意事項(xiàng)
1)此方法比較節(jié)省染料,500 μL染料大約可以做100塊 50mL的膠。
2) 由于WarRed具有良好的熱穩(wěn)定性,可以直接添加到熱的瓊脂糖溶液中而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。也可以選擇將WarRed儲(chǔ)液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中,然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。
3)WarRed兼容所有常用的電泳緩沖溶液。
4)含有染料的預(yù)制凝膠溶液可以大量制備,在室溫下避光保存直至用完。
5)如果總是看到條帶彌散或分離不理想,建議使用泡染法染色以確認(rèn)問(wèn)題是否與染料有關(guān)。如果染色后問(wèn)題依舊存在,則說(shuō)明問(wèn)題與染料無(wú)關(guān),請(qǐng)嘗試:降低瓊脂糖濃度;選用更長(zhǎng)的凝膠;延長(zhǎng)凝膠時(shí)間以保證邊緣清晰;改進(jìn)上樣技巧或選擇泡染法染色。
6)膠染法不適合預(yù)制聚丙烯酰胺凝膠,對(duì)于聚丙烯酰胺凝膠請(qǐng)使用泡染法。
二、泡染法(電泳后染色)
1. 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
2. 用H2O將WarRed 10,000×水溶液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl中,制成3× 染色液。(如將15μL WarRed10,000×水溶液和 5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。
3.將凝膠小心地放入合適的容器中,緩慢加入足量的3× 染色液浸沒(méi)凝膠。室溫振蕩染色30min左右,zuijia染色時(shí)間根據(jù)凝膠厚 度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對(duì)于含3.5~10%聚丙烯酰胺的凝膠,染色時(shí)間通常介于30min到1h,并隨聚丙烯酰胺含 量增加而延長(zhǎng)。
注意事項(xiàng)
1)用泡染法染色時(shí),染料用量較多。單次使用的染色液可重復(fù)使用3次左右。
2)3×WarRed染色液可以大量制備,在室溫下避光保存直至用完。
特別注意事項(xiàng)
1) 關(guān)于核酸染料相關(guān)產(chǎn)品的選擇:
如果您使用紫外成像儀,建議選擇WarRed-EB核酸染料的無(wú)毒替代品,具有同EB相同的光譜特性;如果您 使用激光成像儀或希望在可見(jiàn)光下觀測(cè),請(qǐng)選擇WarGreen,在凝膠染色中是SYBR Green I的*替代品,安全無(wú)毒。WarGreen 雖然具SYBR Green I 相似的光譜特性,且在凝膠染色方面效果優(yōu)于SYBR Green I,但不建議用于qPCR。建議使用專(zhuān)為此用途 設(shè)計(jì)的SUPER Green I 和RTGreen。
2) 極少數(shù)情況下,質(zhì)粒經(jīng)某些酶切后的DNA樣品會(huì)出現(xiàn)拖尾和分辨率降低的問(wèn)題,此時(shí)建議同時(shí)嘗試兩種染色方法以決定哪種 方法更適合。
3 )為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
相關(guān)產(chǎn)品:
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W751-500UL | SYBR Green I (10,000× in DMSO) 核酸凝膠染料 | 500µl | 2950 |
W752-100UL | SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) 核酸凝膠染料 | 100µl | 550 |