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南京億迅生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: 質(zhì)控樣品,人工血清,人工胃液,elisa試劑盒,化學試劑,生物試劑 |

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參考價 | ¥ 695 | ¥ 520 |
訂貨量 | 1 件 | 5 件 |
- 型號
- 品牌
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
- 所在地 南京市
更新時間:2019-11-07 13:50:43瀏覽次數(shù):549
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蛋白質(zhì)羰基檢測試劑盒
自備實驗用品及儀器
天平、恒溫水浴鍋、低溫離心機、漩渦震蕩儀、紫外分光光度計、1 mL石英比色皿和蒸餾水,無水乙醇,乙酸乙酯。
試劑組成和配制
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑0.1g×5支,4℃避光保存。(使用前根據(jù)樣品數(shù),每支加1mL水溶解,每支為10個樣品用量)
試劑二:液體20mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體20mL×1瓶,4℃保存。
試劑四:液體25mL×1瓶,4℃保存。
試劑五:根據(jù)測定樣品量,將乙酸乙酯和無水乙醇等體積混合。
試劑六:液體100mL×1瓶,4℃保存。
樣品處理
組織樣品:稱取約0.1g組織樣品,加入1mL提取液,充分勻漿后于4℃,5000rpm離心10min,取上清,加入0.1mL試劑一,室溫放置10min,4℃,12000rpm離心10min,取上清,然后取20μL測定蛋白含量,剩余的作為待測樣品。
測定步驟和操作表
| 空白管 | 測定管 |
樣品(mL) | 0.2 | 0.2 |
試劑二(mL) |
| 0.4 |
試劑三(mL) | 0.4 |
|
混勻,37℃避光反應1h | ||
試劑四(mL) | 0.5 | 0.5 |
靜置5min,4℃,12000rpm離心15min,棄上清,留沉淀 | ||
試劑五(mL) | 1.0 | 1.0 |
漩渦混勻,4℃,12000rpm離心10min,棄上清,留沉淀 | ||
試劑五(mL) | 1.0 | 1.0 |
漩渦混勻,4℃,12000rpm離心10min,棄上清,留沉淀 | ||
試劑五(mL) | 1.0 | 1.0 |
漩渦混勻,4℃,12000rpm離心10min,棄上清,留沉淀 | ||
試劑六(mL) | 1.0 | 1.0 |
漩渦混勻,37℃溫育15min,沉淀全部溶解后,4℃,12000rpm離心15min,取上清,1mL石英比色皿,試劑六調(diào)零,測定OD370 |
計算公式
蛋白質(zhì)羰基含量(μmol/mg prot)= 227.27×(OD370測定管-OD370測定管)÷樣品蛋白質(zhì)濃度注意事項:
1. 試劑一使用之前根據(jù)要測定的樣品數(shù)現(xiàn)配,配置好后4℃保存,若變?yōu)楹谏?,則不能使用。
2. 試劑二見光易分解,反應需嚴格避光。
蛋白質(zhì)羰基檢測試劑盒