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單克隆抗體法和聯(lián)苯胺法檢測(cè)糞便隱血試劑盒的對(duì)比
2022-3-22 閱讀(1128)
單克隆抗體法和聯(lián)苯胺法檢測(cè)糞便隱血試劑盒的對(duì)比
糞便潛血檢查方法國(guó)內(nèi)主要有化學(xué)檢測(cè)法和試劑帶法兩種,化學(xué)大便潛血檢查試劑是利用血紅蛋白中的亞鐵血紅素,有類似過(guò)氧化物酶的作用,具有弱過(guò)氧化物酶活動(dòng),能催化過(guò)氧化物酶,放出新生態(tài)氧,將無(wú)色的受體氧化為顯色的物質(zhì)的性質(zhì)?，F(xiàn)主要糞便隱血試劑帶法主要利用免疫的方法檢測(cè)人嘔吐物中的人血紅蛋白(Hb)。在檢驗(yàn)試紙條的檢測(cè)線包被有抗人血紅蛋白抗體,質(zhì)控線包被有羊抗鼠IgG抗體,在檢測(cè)試紙條加樣的一端固定有另一抗人血紅蛋白單克隆抗體標(biāo)記的膠體金顆粒。經(jīng)收集處理的標(biāo)本與膠體金顆?；旌虾?如存在人血紅蛋白時(shí),樣品有Hb會(huì)與和膠體金上的抗體結(jié)合,可在檢測(cè)線上出現(xiàn)紅色色帶。
FOBT 是臨床常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目之一，主要是檢測(cè)糞便中的血紅蛋白，對(duì)消化道腫 瘤、消化道出血性疾病的早期診治具有非常重要的價(jià)值。愈創(chuàng)木脂法是最早用 于 FOBT 檢測(cè)的方法，隨后出現(xiàn)的方法包括鄰聯(lián)甲苯胺法、匹拉米洞法、孔雀 綠法等 。
化學(xué)法的檢測(cè)原理大致相同，均是基于血紅蛋白中的亞鐵血紅素有 類似過(guò)氧化酶的活性，能催化 H 2O 2 作為電子受體使色原氧化呈色，且顯色 深淺與血紅蛋白水平呈正相關(guān) 。
鄰聯(lián)甲苯胺法較為靈敏，即使糞便中僅含有 少量的血紅蛋白或存在具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)，都會(huì)使檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性， 例如，受試者食用動(dòng)物血液、內(nèi)臟類食品或食用含有過(guò)氧化物酶的葉綠素的瓜 果蔬菜，均可能出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。因此，在采用鄰聯(lián)甲苯胺法進(jìn)行 FOBT 檢測(cè) 前，應(yīng)囑咐患者素食 3 d，以及禁用鐵劑等藥物 。
其他可導(dǎo)致假陰性結(jié)果的因素包括：
(1) 標(biāo)本中血紅蛋白濃度過(guò)高，受前帶現(xiàn)象影響而出現(xiàn)假陰性結(jié)果；
(2) 血紅蛋白中的 珠蛋白鏈在胃酸的作用下迅速水解，或在小腸內(nèi)被蛋白酶降解，導(dǎo)致血紅蛋白 失去單克隆抗體可特異性識(shí)別、結(jié)合的抗原決定簇，或在體外或胃腸道內(nèi)的細(xì) 菌作用下，糞便中的血紅蛋白缺失免疫活性，導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性結(jié)果；
(3) 試 劑中的 H 2O 2 濃度降低，或因保存不當(dāng)而失效；
(4) 檢測(cè)反應(yīng)時(shí)間不足，顯色 判斷不準(zhǔn)確。與鄰聯(lián)甲苯胺法相比，匹拉米洞半定量法的靈敏度有所降低，微 量血紅蛋白可出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
