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中性紅染色液使用原理！
2021-12-23 閱讀(7219)
中性紅染色液使用原理！
中性紅是一種弱堿性pH指示劑，變色范圍在pH6.4～8.0之間(由紅變黃)。分子式為C15H16N4.HCl，分子量為288.78。在中性或微堿性環(huán)境中，植物的活細胞能大量吸收中性紅并向液泡中排泌。由于液泡在一般情況下呈酸性反應，因此，進入液泡的中性紅便解離出大量陽離子而呈現(xiàn)櫻桃紅色，在這種情況下，原生質(zhì)和細胞壁一般不著色。死細胞由于原生質(zhì)變性凝固，細胞液不能維持在液泡內(nèi)，用中性紅染色后，不產(chǎn)生液泡著色現(xiàn)象，相反，中性紅的陽離子，卻與帶有一 定負電荷的原生質(zhì)及細胞核結(jié)合，而使原生質(zhì)與細胞核染色。
細胞對中性紅的攝入取決于細胞對pH梯度的維持能力，而這種能力是通過產(chǎn)生ATP來維持的。在生理pH條件下，中性紅染料的凈電荷幾乎為零，從而使其能通過非離子被動擴散的方式穿透細胞膜進入細胞。溶酶體(lysosomes)中的質(zhì)子梯度使溶酶體中的pH值低于細胞質(zhì)，從而可以使中性紅帶上電荷并在溶酶體中積累。在細胞增殖加快時，細胞數(shù)量增多，可以攝入的中性紅的量就會增加。在細胞受到損傷時，中性紅的攝入能力會下降。經(jīng)過一定時間攝入后，細胞經(jīng)清洗并用裂解液裂解即可釋放中性紅而用于檢測。這樣通過測定細胞對于中性紅的攝入量，就可以確定細胞的增殖或毒性情況。
