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RNase A/核糖核酸酶A品種齊全，現(xiàn)貨大促
2021-5-18 閱讀(978)
RNase A/核糖核酸酶A品種齊全，現(xiàn)貨大促
核糖核酸酶A是內(nèi)切核糖核酸酶，可特異地攻擊RNA上嘧啶殘基的3'端，切割與相鄰核苷酸形成的磷酸二酯鍵。反應(yīng)終產(chǎn)物是嘧啶3'磷酸及末端帶嘧啶3'磷酸的寡核苷酸。無(wú)輔因子及二價(jià)陽(yáng)離子存在時(shí)，核糖核酸酶A的作用可被胎盤(pán)RNA酶抑制劑(B1ackburn et al．1977)或氧釩—核糖核苷復(fù)合物(Puskas et al．1982)所抑制。
核糖核酸酶A（Ribonuclease A，RNase A），一種含4個(gè)二硫鍵的單鏈多肽，分子量約為13.7 kDa。作為一種核糖核酸內(nèi)切酶（endoribonuclease），特異性降解單鏈RNA上的胞嘧啶（C）或尿嘧啶（U）殘基。具體來(lái)說(shuō)，切割識(shí)別的是由某核苷酸上的5’-核糖和相鄰的嘧啶類(lèi)核苷酸3’-核糖上磷酸基團(tuán)形成的磷酸二酯鍵，從而使得2’,3’-環(huán)磷酸水解為對(duì)應(yīng)的3’-核苷磷酸（比如，pG-pG-pC-pA-pG經(jīng)RNase A切割產(chǎn)生pG-pG-pCp 和A-PG）。
RNase A切割單鏈RNA活性高，且在多種反應(yīng)條件下均有活性：在低鹽濃度（0-100 mM NaCl）下，可用來(lái)切割單鏈RNA、雙鏈RNA以及RNA-DNA雜交形成的RNA鏈，而高鹽濃度（≥0.3 M）下，RNase A僅特異性切割單鏈RNA。
核糖核酸酶A（RNase A）常見(jiàn)的應(yīng)用在于質(zhì)粒DNA或基因組DNA制備過(guò)程中去除RNA，因此制備過(guò)程中DNase酶活性的存在與否是需要重視的污染之一，可采用水浴煮沸這種傳統(tǒng)方法來(lái)滅活DNase活性。另外，本品還可用于RNA酶保護(hù)分析、RNA序列分析等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
本品以溶液形式提供，濃度為10 mg/mL。推薦工作濃度為1-100 μg/mL，因應(yīng)用類(lèi)型的不同而異。
此外，它具有顯著的細(xì)胞毒性，可以殺滅許多腫瘤細(xì)胞系，可以抑制導(dǎo)致艾滋病的HIV-1病毒在細(xì)胞中的復(fù)制，可以治療乙肝。
(1)從DNA-RNA或RNA—RNA雜合體中去除未雜合的RNA區(qū)。
(2)確定DNA或RNA中單堿基突變的位置(Myers et al．1985，Winter et al．1985)。 在此方法中，RNA-DNA或RNA-RNA雜合體上的單堿基錯(cuò)配可被RNA酶A識(shí)別并切割。利用含SP5或T7噬菌體啟動(dòng)子的質(zhì)粒，在體外合成與野生型DNA或RNA互補(bǔ)的32p標(biāo)記RNA探針，然后與待檢含單堿基置換的DNA或RNA退火， 所產(chǎn)生的單堿基錯(cuò)配可用RNA酶A切割，通過(guò)凝膠電泳分析切割產(chǎn)物的大小即可確定錯(cuò)配的位置。在所有各種可能的單堿基錯(cuò)配中，大約50%可用此法確定。
核糖核酸酶A（Ribonuclease A，RNase A），一種含4個(gè)二硫鍵的單鏈多肽，分子量約為13.7 kDa。作為一種核糖核酸內(nèi)切酶（endoribonuclease），特異性降解單鏈RNA上的胞嘧啶（C）或尿嘧啶（U）殘基。具體來(lái)說(shuō)，切割識(shí)別的是由某核苷酸上的5’-核糖和相鄰的嘧啶類(lèi)核苷酸3’-核糖上磷酸基團(tuán)形成的磷酸二酯鍵，從而使得2’,3’-環(huán)磷酸水解為對(duì)應(yīng)的3’-核苷磷酸（比如，pG-pG-pC-pA-pG經(jīng)RNase A切割產(chǎn)生pG-pG-pCp 和A-PG）。
RNase A切割單鏈RNA活性高，且在多種反應(yīng)條件下均有活性：在低鹽濃度（0-100 mM NaCl）下，可用來(lái)切割單鏈RNA、雙鏈RNA以及RNA-DNA雜交形成的RNA鏈，而高鹽濃度（≥0.3 M）下，RNase A僅特異性切割單鏈RNA。
核糖核酸酶A（RNase A）常見(jiàn)的應(yīng)用在于質(zhì)粒DNA或基因組DNA制備過(guò)程中去除RNA，因此制備過(guò)程中DNase酶活性的存在與否是需要重視的污染之一，可采用水浴煮沸這種傳統(tǒng)方法來(lái)滅活DNase活性。另外，本品還可用于RNA酶保護(hù)分析、RNA序列分析等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
本品以溶液形式提供，濃度為10 mg/mL。推薦工作濃度為1-100 μg/mL，因應(yīng)用類(lèi)型的不同而異。
此外，它具有顯著的細(xì)胞毒性，可以殺滅許多腫瘤細(xì)胞系，可以抑制導(dǎo)致艾滋病的HIV-1病毒在細(xì)胞中的復(fù)制，可以治療乙肝。
(1)從DNA-RNA或RNA—RNA雜合體中去除未雜合的RNA區(qū)。
(2)確定DNA或RNA中單堿基突變的位置(Myers et al．1985，Winter et al．1985)。 在此方法中，RNA-DNA或RNA-RNA雜合體上的單堿基錯(cuò)配可被RNA酶A識(shí)別并切割。利用含SP5或T7噬菌體啟動(dòng)子的質(zhì)粒，在體外合成與野生型DNA或RNA互補(bǔ)的32p標(biāo)記RNA探針，然后與待檢含單堿基置換的DNA或RNA退火， 所產(chǎn)生的單堿基錯(cuò)配可用RNA酶A切割，通過(guò)凝膠電泳分析切割產(chǎn)物的大小即可確定錯(cuò)配的位置。在所有各種可能的單堿基錯(cuò)配中，大約50%可用此法確定。
