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檢測沙門氏菌、霉菌和酵母

2021-2-3  閱讀(2725)

檢測沙門氏菌、霉菌和酵母

 

一、
沙門氏菌的檢測方法

一、沙門氏菌快速檢驗(yàn)適用范圍:可用于各類食品和原料中沙門氏菌的定性和初篩檢測。以及突發(fā)事件應(yīng)急檢測需要。



二、沙門氏菌快速檢驗(yàn) 方法原理:將選擇性培養(yǎng)基中加入專一性的辛酯酶顯色劑,并將其加載在紙片上,通過培養(yǎng),如果樣品中含有沙門氏菌,即可在紙片上呈紫紅色的菌落。

三、沙門氏菌檢驗(yàn)操作方法:1樣品處理:無菌稱取待測樣品25g(或25mL)放入含有225mL無菌生理鹽水的采樣瓶或均質(zhì)杯內(nèi),經(jīng)充分振搖或置均質(zhì)器中做成1:10的樣品勻液。2接種:將測試片置于平坦實(shí)驗(yàn)臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置5 min使培養(yǎng)基凝固,zui后用手輕輕地壓 一下。每個樣品接種兩片。3培養(yǎng):將測試片疊在一起放回原自封袋中,堆疊片數(shù)不超過12片,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。4對測試片進(jìn)行觀察,呈紫紅色的菌落為沙門氏菌;呈藍(lán)色的菌落為其他大腸菌,葡萄球菌不生長。

四、檢驗(yàn)方法注意事項(xiàng):1有關(guān)驗(yàn)證試驗(yàn)表明,測試片具有較強(qiáng)的敏感性,在1.5×10-8稀釋時仍可檢出菌落。臨床實(shí)際應(yīng)用結(jié)果顯示陽性檢出率高于分離培養(yǎng)法1.84‰,復(fù)查準(zhǔn)確率提高約13.0%。2 本法還可應(yīng)用于從業(yè)人員體檢、中毒樣品和物體表面的檢測,用取樣棉簽涂抹被測物體表面,放入裝有3mL滅菌生理鹽水的試管中,搖晃10s,然后取1mL接種到測試片上。3注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理 。


 

二、
霉菌和酵母的檢測方法

一、霉菌和酵母的檢驗(yàn)適用范圍:本品可用于各類食品及飲用水中霉菌和酵母菌的計數(shù)。

二、快速檢驗(yàn)的方法原理:將霉菌營養(yǎng)培養(yǎng)基、吸水凝膠和酶顯色劑加載在紙片上,通過培養(yǎng),在酶顯色劑的放大作用下,使霉菌和酵母菌在紙片上顯現(xiàn)出出來,通過計數(shù)報告結(jié)果。與傳統(tǒng)方法相比,省去了配制培養(yǎng)基、消毒和培養(yǎng)器皿的清洗處理等大量輔助性工作,即開即用,操作簡便。培養(yǎng)時間由一周縮短為48h~72h。

三、快速檢驗(yàn)的操作方法:1樣品處理:無菌稱取樣品25g(或25mL)放入含有225mL無菌生理鹽水的采樣瓶或均質(zhì)杯內(nèi),經(jīng)充分振搖做成1:10的稀釋液,用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL,注入含有9mL滅菌水的試管內(nèi),用1mL滅菌吸管反復(fù)吸吹50次做成1:100的稀釋液,以此類推,每個稀釋度更換一支滅菌吸管。2接種:1)一般食品選2~3個稀釋度進(jìn)行檢測,含菌量少的液體樣品(如食用純水和礦泉水等)可直接用原液檢測。將檢驗(yàn)紙片水平放臺面上,揭開上面的透明薄膜,用滅菌吸管吸取樣品原液或稀釋液1mL,均勻加到中央的濾紙片上,然后輕輕將上蓋膜放下,靜置5min,每個稀釋度接種兩片。2)用手指先沿方格區(qū)邊緣刮一下,防止水外流,然后再在中間輕輕推刮,使水分在紙片方格區(qū)內(nèi)均勻分布,并將氣泡趕走。3培養(yǎng):將加了樣的檢驗(yàn)紙片每12片疊放在一起,放入自封袋中,平放在28℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h開始觀察計數(shù)。4結(jié)果判斷與計數(shù):霉菌和酵母菌在紙片上生長后會顯示藍(lán)色斑點(diǎn),霉菌菌落顯示的斑點(diǎn)略大或有點(diǎn)擴(kuò)散,酵母菌落則較小而圓滑,許多霉菌在培養(yǎng)后期全呈現(xiàn)其本身*的顏色。選擇菌落數(shù)適中(10~50個)的紙片進(jìn)行計數(shù),乘以稀釋倍數(shù)后即為每克(或毫升)樣品中霉菌和酵母菌的數(shù)目。



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