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制備培養(yǎng)基及無菌水的方法
2020-10-20 閱讀(2262)
制備培養(yǎng)基及無菌水的方法
一、方法步驟
1、培養(yǎng)基的制備：
（1）稱量：根據(jù)培養(yǎng)基的配方,稱取適量藥品于搪瓷杯中;
（2）溶解：用量筒量取所需水量,置電爐上加熱,一邊攪拌,至*溶解,加熱至沸騰,拔掉電源,待冷卻;
（3）分裝：根據(jù)不同需要,立即趁熱分裝入三角瓶或試管中,分裝三角瓶以不超過三角瓶一半為宜,分裝試管一般為管長的1/5（需根據(jù)試管的大小而定）.液體培養(yǎng)基如乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基約分裝10毫升左右.
（4）塞硅膠塞：裝好培養(yǎng)基的試管應(yīng)塞上硅膠塞,松緊合適,緊貼管壁,不留縫隙,約1/2塞入內(nèi),這樣即可過濾空氣,避免雜菌侵入,又可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā).
（5）包裝：三角瓶棉塞頭部應(yīng)用錫箔紙包扎,試管集中于試管簍.
2、無菌水的制備：
（1）用10ml移液管量取9.2ml蒸餾水（稀釋水）裝入試管中.
（2）用100ml量筒量取95ml蒸餾水（稀釋水）裝入150ml的三角瓶中.可置少許玻璃珠于三角瓶內(nèi),防止暴沸.
（3）量取240ml蒸餾水（稀釋水）于250ml的三角瓶中,塞上瓶塞用牛皮紙包扎好,高壓滅菌備用.
二、器材
三角瓶、試管、燒杯、玻棒、天平、搪瓷杯、量筒、鋁箔紙、角匙、杜氏小管、硅膠塞、電爐
三、培養(yǎng)基的種類
營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基、乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基、伊紅美蘭瓊脂培養(yǎng)基、馬鈴薯-葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（附加抗菌素）、平板計(jì)數(shù)瓊脂、月桂基硫酸鹽胰蛋白凍肉湯、煌綠乳糖膽鹽肉湯、EC肉湯、高鹽察氏瓊脂、三糖鐵瓊脂等
四、基本原理
培養(yǎng)基的種類很多,不同微生物所需要的培養(yǎng)基不同.培養(yǎng)基制成后的物理狀態(tài)可分為液體、固體、半固體三種類型.目前所用培養(yǎng)基均為已配制好的生物試劑和紙片.
