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血液RNA提取試劑盒預防污染至關重要
2020-7-8 閱讀(1436)
血液RNA提取試劑盒預防污染至關重要
核糖核酸（縮寫為RNA，即Ribonucleic Acid），存在于生物細胞以及部分病毒、類病毒中的遺傳信息載體。RNA由核糖核苷酸經(jīng)磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子。一個核糖核苷酸分子由磷酸，核糖和堿基構成。RNA的堿基主要有4種，即A（腺嘌呤）、G（鳥嘌呤）、C（胞嘧啶)、U(尿嘧啶)，其中，U（尿嘧啶）取代了DNA中的T。核糖核酸在體內的作用主要是引導蛋白質的合成。
預防RNase 污染，應注意以下幾方面：
1.經(jīng)常更換新手套。因為皮膚經(jīng)常帶有細菌，可能導致RNase污染。
2.使用無RNase 的塑料制品和槍頭避免交叉污染。
3.RNA 在Buffer PR中時不會被RNase 降解。但提取后繼續(xù)處理過程中應使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在1500C
4.烘烤4小時，塑料器皿可在0.5 M NaOH 中浸泡10 分鐘，然后用水*清洗，再滅菌，即可去除RNase。
5.配制溶液應使用RNase-free ddH2O。（將水加入到干凈的玻璃瓶中，加入DEPC 至終濃度0.1%( v/v)，混勻后放置過夜，高壓滅菌）。
溶液的稀釋準備：
使用前50T的規(guī)格加入52 ml ；100T加入104 ml 無水乙醇
Buffer R1（10X）需按1:9稀釋。
Buffer R2使用前加入β-巰基乙醇，使終濃度為1%，如1ml Buffer R2加入10μl巰基乙醇。
可能出現(xiàn)的問題與對策：
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