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南京億迅生物科技有限公司
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非血紅素鐵檢測(cè)試劑盒(紅菲咯啉比色法)使用注意事項(xiàng):
2024-1-16 閱讀(296)
非血紅素鐵檢測(cè)試劑盒(紅菲咯啉比色法)使用注意事項(xiàng):
產(chǎn)品名稱：非血紅素鐵檢測(cè)試劑盒(紅菲咯啉比色法)
規(guī)格：50T
儲(chǔ)存：4℃避光
有效期：6個(gè)月
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
鐵是人體必需的微量元素之一，也是人體中含量最多的微量元素。鐵離子通常以三價(jià)鐵形式與轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合，通過(guò)轉(zhuǎn)鐵蛋白通道進(jìn)入細(xì)胞，被金屬還原酶STEAP3還原成二價(jià)鐵后，參與后續(xù)多種生理和生化過(guò)程。機(jī)體內(nèi)鐵元素的缺乏會(huì)引發(fā)各種缺鐵性疾病，如貧血、免疫力低下等，此外還會(huì)導(dǎo)致消化不良、記憶力低下等消化系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)疾病。然而，盡管鐵元素對(duì)于機(jī)體如此重要，卻也不是越多越好的。
進(jìn)入細(xì)胞的鐵被還原成亞鐵離子后，會(huì)優(yōu)先形成各種鐵結(jié)合復(fù)合物，參與到各項(xiàng)生理和生化反應(yīng)中去。當(dāng)這些復(fù)合物含量接近飽和時(shí)，多余的二價(jià)鐵會(huì)在細(xì)胞中積累，形成不穩(wěn)定鐵池。鐵池中游離的二價(jià)鐵參與芬頓反應(yīng)，生成以羥基自由基為代表的活性氧（ROS）物質(zhì)，積累的ROS將膜脂過(guò)氧化，從而造成細(xì)胞功能喪失和細(xì)胞死亡。這是細(xì)胞鐵死亡的經(jīng)典調(diào)控途徑之一。
動(dòng)物組織或細(xì)胞提取物中非血紅素鐵含量的多少，反應(yīng)出細(xì)胞或組織貯存鐵含量的變化。非血紅素鐵含量的測(cè)定可避免總鐵含量測(cè)定中樣品內(nèi)血紅素鐵的影響。
非血紅素鐵檢測(cè)試劑盒與總鐵測(cè)定方法相似，但樣品須經(jīng)酸和熱處理，經(jīng)離心后非血紅素鐵釋放到上清液中，而含血紅素鐵的蛋白則留在沉淀中。其測(cè)定原理是動(dòng)物組織或細(xì)胞經(jīng)組織消化液在酸性加熱條件處理后，經(jīng)離心可分離出血紅素鐵和非血紅素鐵，非血紅素鐵再被還原劑還原為二價(jià)鐵后與紅菲咯啉生成紅色化合物，在500~550nm有強(qiáng)吸收，可通過(guò)酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)測(cè)定。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。
注意事項(xiàng)：
1、操作中的手術(shù)器械、槍頭、容器、96 孔板等，一定保證干燥且干凈，避免鐵污染。
2、組織非血紅素鐵差異較小，一定每個(gè)組織和管子都稱重，國(guó)產(chǎn)管子的重量相差很多。
3、試劑盒是否過(guò)期驗(yàn)證：取 10ul 鐵標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)液(100μg/ml)加入 200ul 鐵顯色工作液，看是否顯色為深紅色，如是，則試劑沒(méi)過(guò)期，可繼續(xù)使用。
4、試劑有效性判讀：用空白管 1 作對(duì)照調(diào)零，如空白管 2 讀數(shù)＜0.004 說(shuō)明沒(méi)有污染可以使用，如果空白管 2 讀數(shù)＞0.004，說(shuō)明組織消化液有污染。
5、組織消化液有強(qiáng)酸性和腐蝕性，請(qǐng)小心操作。
6、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
