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南京億迅生物科技有限公司
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蝦堿性磷酸酶使用注意事項(xiàng)
2023-5-5 閱讀(825)
蝦堿性磷酸酶使用注意事項(xiàng)
Alkaline Phosphatase，中文名堿性磷酸酶，可將DNA、RNA的5’端磷酸基團(tuán)去除，常用于阻止載體的自連作用：在分子克隆實(shí)驗(yàn)中，DNA連接酶催化DNA連接時(shí)需要有磷酸基團(tuán)的存在，載體在經(jīng)酶切后會(huì)在切點(diǎn)端保留一個(gè)磷酸基團(tuán)。而載體經(jīng)堿性磷酸酶去磷酸化后因5’ 端無(wú)磷酸基團(tuán)，因而不可以和自身3’ 端連接。因此連接反應(yīng)中載體本身會(huì)優(yōu)先發(fā)生的連接反應(yīng)被阻止，提高了目的片段插入率。另外，堿性磷酸酶還可制備用于5’端標(biāo)記的DNA模板。
本品為蝦來(lái)源的堿性磷酸酶，可以降解幾乎所有磷酸單酯，但是該酶不能水解磷酸二酯或磷酸三酯。該酶作用于末端去磷酸化，無(wú)論末端為粘端，還是平端。SAP 也可以用來(lái)降解PCR 反應(yīng)中的dNTP，用于后續(xù)測(cè)序和SNP分析。
來(lái)源（Source） 來(lái)自畢赤酵母，克隆有北極蝦（Pandalus rorealis）的蝦堿性磷酸酶基因
質(zhì)量控制（Quality Control） 無(wú)核糖核酸酶、脫氧核糖核酸酶污染
純度（Purity） ＞95%
熱滅活（Thermal Inactivation） 65℃溫浴5 min，活性完全不可逆喪失
活性定義（Unit definition） 在25℃條件下，30分鐘能使1 μg經(jīng)HindⅢ(產(chǎn)生5’突出末端)消化的pUC19 DNA去磷酸化所需的酶量定位為1個(gè)活力單位。
注意事項(xiàng)
1）1×SAP Buffer: 50mM Bis-Tris HCl (pH 6.0)，1 mM MgCl2，0.1 mM ZnCl2，25℃溫育。
2）熱失活：65℃加熱5分鐘，不可逆失活。當(dāng)完成去磷酸化反應(yīng)后，無(wú)需純化產(chǎn)物，可以直接用于后續(xù)連接反應(yīng)。
3）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
4) 本產(chǎn)品僅作科研用途!
