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果糖含量試劑盒(間ben二酚比色法)微板法
果糖含量試劑盒(間ben二酚比色法)微板法
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果糖含量試劑盒(間ben二酚比色法)微板法
果糖是一種較為常見(jiàn)的己酮糖,是葡萄糖的同分異構(gòu)體,以游離狀態(tài)大量存在于水果的 漿汁和蜂蜜中。

果糖含量試劑盒(間ben二酚比色法)微板法

果糖含量試劑盒(間ben二酚比色法)微板法

本試劑盒僅供科研使用 1 果糖(fructose含量(間*二酚法)試劑盒說(shuō)明書 (貨號(hào):WS5050W 微板法 96 樣) 一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介: 果糖是一種較為常見(jiàn)的己酮糖,是葡萄糖的同分異構(gòu)體,以游離狀態(tài)大量存在于水果的 漿汁和蜂蜜中。本試劑盒檢測(cè)果糖,是通過(guò)果糖與間*二酚反應(yīng),生成有色物質(zhì),在 480nm 下有特征吸收峰,進(jìn)而求得待檢測(cè)樣本果糖含量。 二、試劑盒組分與配制: 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 液體 30 mL×1 4℃保存 試劑二 液體 10 mL×1 4℃保存 標(biāo)準(zhǔn)品 粉劑 mg×1 4℃保存 臨用前加1mL蒸餾水溶解, 1mg/mL 果糖溶液 三、所需的儀器和用品: 酶標(biāo)儀、96 孔板、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽、乙醇、蒸餾水。 四、果糖含量的測(cè)定: 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn) 樣本和試劑浪費(fèi)! 建議:可取兩個(gè)樣本做適當(dāng)梯度的稀釋(如 2-5 倍),確定適合本次實(shí)驗(yàn)的稀釋倍數(shù) D。 1、樣本制備 ① 組織樣本: 稱取 0.1g 樣本(若是干樣,如烘干煙葉等可取 0.05g;若是水分充足的樣本可取 0.2g), 先加入 0.8mL 80%乙醇(自備:取 80mL 乙醇溶于 20mL 蒸餾水中),冰浴勻漿,倒入 有蓋離心管中,再用 80%乙醇沖洗研缽并轉(zhuǎn)移至同一 EP 管中,使 EP 管中粗提液終體積 定容為 1.5mL(若用自動(dòng)研磨機(jī)可直接加入 1.5mL 80%乙醇研磨);置 50℃水浴 20min (封口膜纏緊,防止液體散失,且間隔 2min 振蕩混勻一次),冷卻后(若有損失,可加 80%乙醇補(bǔ)齊至 1.5mL),12000rpm,室溫離心 10min,取上清液備用。 ② 液體樣本: 澄清的液體樣本直接檢測(cè),若渾濁則需 12000rpm,室溫離心 10min,取上清液備用。 2、 上機(jī)檢測(cè) ① 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 480nm② 在 EP 管中依次加入下列試劑: 試劑(μL測(cè)定管 標(biāo)準(zhǔn)管 (僅做一次) 空白管 (僅做一次) 樣本 30 標(biāo)準(zhǔn)品 30 蒸餾水 30 試劑一 210 210 210 試劑二 60 60 60 混勻,95℃水浴反應(yīng) 30min(可用封口膜纏緊,以防止水 分散失),冷卻后取 200μL 96 孔板中,在 480nm 分別 讀取吸光值 A,A=A 測(cè)定-A 空白。本試劑盒僅供科研使用 2 【注】:如果ΔA 大于 1,需要將樣本用蒸餾水稀釋,計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù) D。 五、結(jié)果計(jì)算: 1、按照重量計(jì)算: 果糖含量(mg/g 重量)=(C 標(biāo)準(zhǔn)×V1)×A÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)÷(W×V1÷V)×D =1.5×A÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)÷W×D 2、按液體體積計(jì)算: 果糖含量(mg /mL 液體)= (C 標(biāo)準(zhǔn)×V1)×A÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)÷V1×D =A÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)×D C 標(biāo)準(zhǔn)---果糖標(biāo)準(zhǔn)品濃度,1mg/mL; V---加入提取液體積,1.5mL; V1---加入樣本積,0.03mL; W---樣本鮮重,g; D---稀釋倍數(shù)。



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