| 上海宇淳生物科技有限公司
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| 參考價(jià) | ￥840 |
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型號(hào)
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷商 -
所在地
上海市
| 48T | 840元 | 1 盒 可售 |
更新時(shí)間：2024-05-31 10:35:56瀏覽次數(shù)：205
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土壤核酸酶活性測(cè)定試劑盒,微板法
土壤核酸酶活性測(cè)定試劑盒,微板法
本試劑盒僅供科研使用 1 土壤核酸酶活性測(cè)定試劑盒說(shuō)明書 （貨號(hào)：WS3430W 微板法 48 樣） 一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介： 核酸是土壤有機(jī)磷的組分之一，在核酸酶的作用下，核酸經(jīng)過(guò)多步分解最終釋放出無(wú) 機(jī)磷，水解產(chǎn)物是植物的磷源之一。土壤核酸酶的活性通過(guò)度量土壤核苷酸酶的活性測(cè)得。 土壤核酸酶即土壤核苷酸酶通過(guò)水解底物核糖核苷酸生成無(wú)機(jī)磷和其他物質(zhì)，無(wú)機(jī)磷在 酸性環(huán)境中與鉬酸銨反應(yīng)生成藍(lán)色復(fù)合物，通過(guò)在 700nm 處檢測(cè)該有色物質(zhì)的生成速率 即可計(jì)算土壤核酸酶活性大小。 二、試劑盒組成和配制： 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 液體 60mL×1 瓶 4℃保存 試劑二 粉劑 mg×1 瓶 4℃保存 臨用前甩幾下使試劑落入底部，再加 入 55mL 試劑一，充分溶解備用， 試劑三 液體 50mL×1 瓶 4℃保存 試劑四 液體 10mL×1 瓶 4℃保存 試劑五 粉劑 mg×2 支 4℃保存 臨用前甩幾下使試劑落入底部，每支 加入 1.5mL 蒸餾水，充分溶解備用。 試劑六 粉劑 mg×5 支 4℃保存 臨用前甩幾下使試劑落入底部，每支 加入 0.5mL 蒸餾水溶解，現(xiàn)配現(xiàn)用。 標(biāo)準(zhǔn)品 粉劑 mg×1 支 4℃保存 若重新做標(biāo)曲，則用到該試劑。 【注】：全程操作需無(wú)磷環(huán)境；試劑配置用新的槍頭和玻璃移液器等，也可以用一次性塑料器皿， 避免磷污染。 三、所需的儀器和用品： 酶標(biāo)儀、96 孔板、天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋，可調(diào)式移液器。 四、土壤核酸酶活性測(cè)定： 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣本情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn) 樣本和試劑浪費(fèi)！ 1、樣本制備： 取新鮮土樣風(fēng)干或者 30℃烘箱風(fēng)干，先粗研磨，過(guò) 40 目篩備用。 【注】：土壤風(fēng)干，減少土壤中水分對(duì)于實(shí)驗(yàn)的干擾；土壤過(guò)篩，保證取樣的均勻細(xì)膩； 2、上機(jī)檢測(cè)： ① 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 700nm。 ② 在 EP 管中依次加入： 試劑名稱（μL） 測(cè)定管 對(duì)照管 土壤樣本（g） 0.1 0.1 試劑二 500 混勻，37℃振蕩培養(yǎng) 2h（間隔 30min 振蕩混勻一次） 試劑三 500 500 試劑二 500 立即混勻，于 12000rpm，室溫或 4℃離心 10min，本試劑盒僅供科研使用 2 上清液需立即測(cè)定，不可久置。 ③ 顯色反應(yīng)，在 96 孔板中依次加入： 上清液 40 40 試劑四 100 100 試劑五 20 20 試劑六 20 20 混勻，室溫靜置 10min，于 700nm 處讀取吸光值 A， △A=A 測(cè)定-A 對(duì)照（每個(gè)樣本需做一個(gè)自身對(duì)照）。 【注】：若△A 值在零附近徘徊，可在 37℃孵育階段延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間 T(如增至 3h 或更長(zhǎng))，或增 加土壤樣本量 W（如增至 0.2g），則改變后的反應(yīng)時(shí)間 T 和 W 需代入公式重新計(jì)算。 五、結(jié)果計(jì)算： 1、標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：y = 0.5788x-0.0004，x 是標(biāo)準(zhǔn)品摩爾濃度（μmoL/mL）, y 是△A。 2、酶活定義：37℃條件下，每克土樣每小時(shí)釋放出 1μmol 的無(wú)機(jī)磷為一個(gè)酶活力單位。 土壤核酸酶活性(μmol/h/g 土樣)=(△A+0.0004)÷0.5788×V1÷W÷T =0.864×(△A+0.0004)÷W V1---孵育階段的反應(yīng)總體積，1mL； T---反應(yīng)時(shí)間，2h； W---樣本質(zhì)量，g； 附：標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過(guò)程： 1 制備標(biāo)準(zhǔn)品母液（5μmoL/mL）：標(biāo)準(zhǔn)品用 10mL 蒸餾水溶解。（母液需在兩天內(nèi)用）。 2 把母液用試劑一稀釋成六個(gè)濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品：0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5. μmoL/mL。 也可根據(jù)實(shí)際樣本來(lái)調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。 3 依據(jù)顯色反應(yīng)階段測(cè)定管的加樣體系操作，根據(jù)結(jié)果即可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
