| 上海宇淳生物科技有限公司
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| 參考價 | ￥1200 |
-
型號
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷商 -
所在地
上海市
| 48T | 1200元 | 1 盒 可售 |
更新時間：2024-05-31 10:12:26瀏覽次數(shù)：216
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土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)試劑盒,微板法
土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)試劑盒,微板法
本試劑盒僅供科研使用 1 土壤芳基硫酸酯酶（Solid-aryl sulfatase，S-ASF）試劑盒說明書 （貨號：WS6330W 微板法 48 樣） 一、產(chǎn)品簡介： 土壤芳基硫酸酯酶（EC 3.1.6.1）來自于土壤微生物，能酶促土壤有機硫化物轉(zhuǎn)化為植 物可吸收的無機態(tài)硫，在硫素的生物化學(xué)循環(huán)和植物的硫營養(yǎng)代謝中具有重要的作用，是 反映土壤質(zhì)量的一個重要生物學(xué)指標(biāo)。 土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)能夠催化對-硝基苯硫酸鉀生成對-硝基*酚（PNP），后者在 410nm 有特征光吸收。通過測定 410nm 光吸收增加速率，即可計算 S-ASF 酶活性大小。 二、試劑盒組成和配制： 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 粉劑 mg×2 支 -20℃保存 用前甩幾下使試劑落入底部， 每支加 1.5mL 試劑二溶解備用。 試劑二 液體 23mL×1 瓶 4℃保存 試劑三 液 25mL×1 瓶 4℃保存 標(biāo)準(zhǔn)品 粉劑×1 支 4℃保存 若重新做標(biāo)曲，則用到該試劑。 三、所需的儀器和用品： 酶標(biāo)儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96 孔板、甲苯（自備）和蒸餾水。 四、土壤芳基硫酸酯酶（S-ASF）活性測定： 建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗 樣本和試劑浪費！ 1、樣本的制備： 取新鮮土樣風(fēng)干或者 37℃烘箱風(fēng)干，先粗研磨，過 40 目篩網(wǎng)備用。 【注】：土壤風(fēng)干，減少土壤中水分對于實驗的干擾；土壤過篩，保證取樣的均勻細(xì)膩； 2、上機檢測： ① 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 410nm。 ② 在 EP 管中依次加入： 試劑名稱（μL） 測定管 對照管 土樣（g） 0.05 0.05 甲苯 10 10 振蕩混勻，使土樣全部濕潤，室溫放置 10min 試劑一 50 試劑二 200 250 混勻， 37℃振蕩反應(yīng) 1h 試劑三 250 250 混勻，室溫靜置 2min，12000rpm 室溫離心 10min，取 200μL 上清液于 96 孔板中，于 410nm 下讀取吸光值 A，△A= A 測定- A 對照（每個樣 本需做一個自身對照）。 【注】：1.若ΔA 過小，可以增加土樣量（如至 0.1g）或延長保溫時間（如：2h 或更長），重新調(diào)整 的樣本量 W 和反應(yīng)時間 T 需代入計算公式重新計算。 2.若 A 測定超過 1.5，可取 100μL 上清液加 100μL 蒸餾水（相當(dāng)于稀釋 2 倍）于 96 孔板中 檢測，或者減少土樣量，或者降低保溫時間（如：10min），則稀釋倍數(shù) D 和重新調(diào)整的本試劑盒僅供科研使用 2 樣本量 W 和反應(yīng)時間 T 需代入計算公式重新計算。 五、結(jié)果計算： 1、標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：y = 0.1645x - 0.0011；x 為標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量（μg），y 為吸光值ΔA。 2、單位定義：每小時每克土樣中產(chǎn)生 1μg 對-硝基*酚（PNP）定義為一個酶活力單位。 土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)活性(μg/h/g 土樣)=(ΔA+0.0011)÷0.1645÷W÷T =6.08×(ΔA+0.0011)÷W T---反應(yīng)時間，1h； W---實際稱取干土質(zhì)量； PNP 相對分子質(zhì)量---139.11。 附：標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過程： 1 制備標(biāo)準(zhǔn)品母液（1mg/mL）：向標(biāo)準(zhǔn)品 EP 管里面加入 1ml 蒸餾水。 2 把母液稀釋成以下濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品：0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5mg/mL。也可根據(jù)實際 樣本來調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。 3 在 EP 管加入：10μL 標(biāo)準(zhǔn)品+10μL 甲苯+240μL 試劑二+250μL 試劑三，混勻，取 200μL 至 96 孔板中，于 410nm 下讀取吸光值。 4 根據(jù)結(jié)果制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
