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土壤錳過氧化物酶(S-Mnp)試劑盒,微板法
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【簡單介紹】
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土壤錳過氧化物酶(S-Mnp)試劑盒,微板法
錳過氧化物酶(EC1.11.1.13,Mnp)是真菌分泌的一種糖基化的胞外蛋白,含亞鐵血紅 素的過氧化物酶,主要存在于引起白腐的木腐菌和土壤枯草菌這兩個擔子真菌中,屬于木 質素降解酶系

土壤錳過氧化物酶(S-Mnp)試劑盒,微板法

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本試劑盒僅供科研使用 1 土壤錳過氧化物酶(S-Mnp)試劑盒說明書 (貨號:WS0330W 微板法 48 樣) 一、產品簡介: 錳過氧化物酶(EC1.11.1.13Mnp)是真菌分泌的一種糖基化的胞外蛋白,含亞鐵血紅 素的過氧化物酶,主要存在于引起白腐的木腐菌和土壤枯草菌這兩個擔子真菌中,屬于木 質素降解酶系,能有效的降解木質素及廢水和環(huán)境中其他一些抗性物質,如腐殖質酸和包 括多環(huán)芳烴在內的多種有機污染物等。 土壤錳過氧化物酶(S-Mnp)在 Mn2+存在的條件下,將二甲氧基*酚(DMP)氧化生成 的產物在 470nm 處有特征吸收峰。通過檢測該產物在 470nm 處的增加速率,即可得到 Mnp 酶活性大小。 二、試劑盒組分與配制: 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 液體 30mL×1 4℃保存 試劑二 粉劑×1 4℃保存 用前甩幾下使粉劑落入底部,再加 8mL 無水乙醇溶解備用。 試劑三 粉劑×1 4℃保存 用前甩幾下使粉劑落入底部,再加 3mL 蒸餾水充分溶解備用。 試劑四 液體×1 4℃保存 用前甩幾下使液體落入底部,準備 三個新的 EP 管:每管中加入 2µL 液體,再加 1mL 蒸餾水混勻備用。 三、所需的儀器和用品: 酶標儀、96 孔板、低溫離心機、可調式移液器、天平、恒溫震蕩培養(yǎng)箱。 四、土壤錳過氧化物酶(S-Mnp)活性測定: 建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗 樣本和試劑浪費! 1、樣本制備: 取新鮮土樣風干或者 37 度烘箱風干,先粗研磨,過 40 目篩備用。 【注】:土壤風干,減少土壤中水分對于實驗的干擾;土壤過篩,保證取樣的均勻細膩; 2、上機檢測: 1 酶標儀預熱 30min 以上,調節(jié)波長至 470nm。 2 所有試劑至常溫狀態(tài)。 3 EP 管中依次加入: 試劑名稱(μL測定管 對照管 土樣(g0.05 0.05 試劑一 200 340 試劑二 140 試劑三 20 20 試劑四 40 40 充分混勻,30℃震蕩反應 2h 后,于 12000rpm,4℃離心 10min, 200μL 96 孔板中,讀取 470nm 處吸光值 A,A=A 測定管 - A 對照管(每個樣本需做一個自身對照)。 【注】若A 值較低,可加大土壤樣本量或者延長反應時間,則改變后的樣本質量 W 和反應時間本試劑盒僅供科研使用 2 T 需代入計算公式重新計算。 五、結果計算: 酶活性定義:每克土壤每天氧化 1nmol DMP 所需酶量為一個酶活力單位。 S-MnP 活性(nmol/d/g 土樣)=(A÷ε÷d)×109×V÷W÷T=174.5×A÷W ε---DMP 被氧化的產物的摩爾消光系數(shù):55000L/mol/cmd---96 孔板光徑,0.5cm; V---反應總體積,4×10-4 LW---樣本質量,g; T---反應時間,2h=1/12d



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