| 上海宇淳生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： PCR八聯(lián)排管,sigma現(xiàn)貨,Cy7試劑 |
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| 參考價(jià) | ￥1050 |
-
型號(hào)
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷商 -
所在地
上海市
| 48T | 1050元 | 1 盒 可售 |
更新時(shí)間：2024-05-30 11:09:18瀏覽次數(shù)：281
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土壤錳過氧化物酶(S-Mnp)試劑盒,微板法
土壤錳過氧化物酶(S-Mnp)試劑盒,微板法
本試劑盒僅供科研使用 1 土壤錳過氧化物酶（S-Mnp）試劑盒說明書 （貨號(hào)：WS0330W 微板法 48 樣） 一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介： 錳過氧化物酶（EC1.11.1.13，Mnp）是真菌分泌的一種糖基化的胞外蛋白，含亞鐵血紅 素的過氧化物酶，主要存在于引起白腐的木腐菌和土壤枯草菌這兩個(gè)擔(dān)子真菌中，屬于木 質(zhì)素降解酶系，能有效的降解木質(zhì)素及廢水和環(huán)境中其他一些抗性物質(zhì)，如腐殖質(zhì)酸和包 括多環(huán)芳烴在內(nèi)的多種有機(jī)污染物等。 土壤錳過氧化物酶（S-Mnp）在 Mn2+存在的條件下，將二甲氧基*酚（DMP）氧化生成 的產(chǎn)物在 470nm 處有特征吸收峰。通過檢測(cè)該產(chǎn)物在 470nm 處的增加速率，即可得到 Mnp 酶活性大小。 二、試劑盒組分與配制： 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 液體 30mL×1 瓶 4℃保存 試劑二 粉劑×1 瓶 4℃保存 用前甩幾下使粉劑落入底部，再加 8mL 無水乙醇溶解備用。 試劑三 粉劑×1 瓶 4℃保存 用前甩幾下使粉劑落入底部，再加 3mL 蒸餾水充分溶解備用。 試劑四 液體×1 支 4℃保存 用前甩幾下使液體落入底部，準(zhǔn)備 三個(gè)新的 EP 管：每管中加入 2µL 液體，再加 1mL 蒸餾水混勻備用。 三、所需的儀器和用品： 酶標(biāo)儀、96 孔板、低溫離心機(jī)、可調(diào)式移液器、天平、恒溫震蕩培養(yǎng)箱。 四、土壤錳過氧化物酶（S-Mnp)活性測(cè)定： 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn) 樣本和試劑浪費(fèi)！ 1、樣本制備： 取新鮮土樣風(fēng)干或者 37 度烘箱風(fēng)干，先粗研磨，過 40 目篩備用。 【注】：土壤風(fēng)干，減少土壤中水分對(duì)于實(shí)驗(yàn)的干擾；土壤過篩，保證取樣的均勻細(xì)膩； 2、上機(jī)檢測(cè)： 1 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 470nm。 2 所有試劑至常溫狀態(tài)。 3 在 EP 管中依次加入： 試劑名稱（μL） 測(cè)定管 對(duì)照管 土樣（g） 0.05 0.05 試劑一 200 340 試劑二 140 試劑三 20 20 試劑四 40 40 充分混勻，30℃震蕩反應(yīng) 2h 后，于 12000rpm，4℃離心 10min， 取 200μL 于 96 孔板中，讀取 470nm 處吸光值 A，△A=A 測(cè)定管 - A 對(duì)照管（每個(gè)樣本需做一個(gè)自身對(duì)照）。 【注】若△A 值較低，可加大土壤樣本量或者延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，則改變后的樣本質(zhì)量 W 和反應(yīng)時(shí)間本試劑盒僅供科研使用 2 T 需代入計(jì)算公式重新計(jì)算。 五、結(jié)果計(jì)算： 酶活性定義：每克土壤每天氧化 1nmol 的 DMP 所需酶量為一個(gè)酶活力單位。 S-MnP 活性(nmol/d/g 土樣)=(△A÷ε÷d)×109×V÷W÷T=174.5×△A÷W ε---DMP 被氧化的產(chǎn)物的摩爾消光系數(shù)：55000L/mol/cm； d---96 孔板光徑，0.5cm； V---反應(yīng)總體積，4×10-4 L； W---樣本質(zhì)量，g； T---反應(yīng)時(shí)間，2h=1/12d
