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溶jun酶(LZM)試劑盒,微板法
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96T550元1 盒 可售

更新時間:2024-05-28 16:06:58瀏覽次數(shù):334

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【簡單介紹】
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溶jun酶(LZM)試劑盒,微板法
溶*酶又叫胞壁質(zhì)酶或 N-乙酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶。能催化某些細(xì)菌細(xì)胞壁多糖的水解, 從而溶解這些細(xì)菌的細(xì)胞壁,起到殺死細(xì)菌的作用。

溶jun酶(LZM)試劑盒,微板法

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本試劑盒僅供科研使用 1 溶*酶(LYS/LZM)檢測試劑盒說明書 (貨號:WS7021W 微板法 96 樣) 一、產(chǎn)品簡介: 溶*酶又叫胞壁質(zhì)酶或 N-乙酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶。能催化某些細(xì)菌細(xì)胞壁多糖的水解, 從而溶解這些細(xì)菌的細(xì)胞壁,起到殺死細(xì)菌的作用。 溶*酶可使一定濃度的渾濁菌液降解,使?jié)岫冉档停腹舛仍黾?,可通過光度變化來測 定溶*酶活性大小。 二、試劑盒組分與配制: 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 液體 30mL×1 4℃保存 試劑二 粉劑 mg×1 4℃干燥保存 臨用甩幾下使粉劑落入底 部,再加 22mL 試劑一渦旋 振蕩,至全部溶解備用。 標(biāo)準(zhǔn)品 粉劑 mg×1 -20℃保存 三、所需儀器和用品: 酶標(biāo)儀、96 孔板、可調(diào)式移液器、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、離心機(jī)、蒸餾水。 四、溶*酶(LYS/LZM)活性檢測: 建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定了解本批樣品情況,熟悉實驗流程避免實 驗樣本和試劑浪費! 1、 樣本制備: ① 液體樣本:澄清的液體直接檢測,若渾濁則離心后取上清液檢測。 ② 組織樣本:取約 0.1g 組織,加入 1mL 生理鹽水,進(jìn)行冰浴勻漿。4℃×12000rpm 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取。 2、上機(jī)檢測: ① 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min,設(shè)定溫度 37℃,設(shè)定波長到 530nm② 標(biāo)準(zhǔn)品制備:臨用前甩幾下使粉劑落入底部,再1mL 蒸餾水充分溶解,再用蒸餾水 稀釋 100 倍(即 199),終濃度為 200U/mL,即 10μg/mL③ 所有試劑在 37℃條件下孵育 5min,在 96 孔板中依次加入: 試劑(μL測定管 標(biāo)準(zhǔn)管(僅做一次) 樣本 20 標(biāo)準(zhǔn)品 20 試劑二 200 200 混勻,30s 530nm 讀取吸光值 A12min30s 時再 讀取 A2A=A1-A2。 【注】:1.加完試劑二反應(yīng)即開始,若是批量檢測,建議加完樣本后,用排槍加試劑二,避本試劑盒僅供科研使用 2 免加樣時間造成測定誤差或者分批測定樣本。 2.A2 的值小于 0.2,可對樣本用蒸餾水稀釋后再測定。稀釋倍數(shù) D 代入公式計算。 3.若測定管的A 小于 0.005,可增加樣本上清液體積 V2(如增至 50μL,則標(biāo)準(zhǔn)管多加 30μL 蒸餾水,保證兩管總體積一致),則改變后的 V2 代入計算公式重新計算。 五、結(jié)果計算: 1、按照體積計算: 溶*酶含量(μg/mL)=C 標(biāo)準(zhǔn)×A 測定管÷A 標(biāo)準(zhǔn)管×D=10×A 測定管÷A 標(biāo)準(zhǔn)管×D 2、按樣本鮮重計算: 溶*酶含量(μg/g)=(C 標(biāo)準(zhǔn)×V1)×A 測定管÷A 標(biāo)準(zhǔn)管×D÷(W×V2÷V) =10×A 測定管÷A 標(biāo)準(zhǔn)管÷W×D 3、按樣本蛋白濃度計算: 溶*酶含量(μg/mg prot)=(C 標(biāo)準(zhǔn)×V1)×A 測定管÷A 標(biāo)準(zhǔn)管×D÷(Cpr×V2÷V) =10×A 測定管÷A 標(biāo)準(zhǔn)管÷Cpr×D C 標(biāo)準(zhǔn)---標(biāo)品濃度,200U/mL,即 10μg/mL; V1---標(biāo)準(zhǔn)品加樣體積,20μL=0.02mLV2---樣本加樣體積,20μL=0.02mL; D---稀釋倍數(shù),未稀釋即為 1; V ---提取液,1mL; W---取樣質(zhì)量,g; Cpr---樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;建議使用本公司的蛋白含量測定試劑盒。



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