上海宇淳生物科技有限公司
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參考價 | ¥550 |
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型號
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質
經銷商 -
所在地
上海市
96T | 550元 | 1 盒 可售 |
更新時間:2024-05-28 16:06:58瀏覽次數(shù):229
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溶jun酶(LZM)試劑盒,微板法
溶jun酶(LZM)試劑盒,微板法
本試劑盒僅供科研使用 1 溶*酶(LYS/LZM)檢測試劑盒說明書 (貨號:WS7021W 微板法 96 樣) 一、產品簡介: 溶*酶又叫胞壁質酶或 N-乙酰胞壁質聚糖水解酶。能催化某些細菌細胞壁多糖的水解, 從而溶解這些細菌的細胞壁,起到殺死細菌的作用。 溶*酶可使一定濃度的渾濁菌液降解,使?jié)岫冉档停腹舛仍黾?,可通過光度變化來測 定溶*酶活性大小。 二、試劑盒組分與配制: 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 液體 30mL×1 瓶 4℃保存 試劑二 粉劑 mg×1 瓶 4℃干燥保存 臨用甩幾下使粉劑落入底 部,再加 22mL 試劑一渦旋 振蕩,至全部溶解備用。 標準品 粉劑 mg×1 支 -20℃保存 三、所需儀器和用品: 酶標儀、96 孔板、可調式移液器、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、離心機、蒸餾水。 四、溶*酶(LYS/LZM)活性檢測: 建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實 驗樣本和試劑浪費! 1、 樣本制備: ① 液體樣本:澄清的液體直接檢測,若渾濁則離心后取上清液檢測。 ② 組織樣本:取約 0.1g 組織,加入 1mL 生理鹽水,進行冰浴勻漿。4℃×12000rpm 離 心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取。 2、上機檢測: ① 酶標儀預熱 30min,設定溫度 37℃,設定波長到 530nm。 ② 標準品制備:臨用前甩幾下使粉劑落入底部,再加 1mL 蒸餾水充分溶解,再用蒸餾水 稀釋 100 倍(即 1:99),終濃度為 200U/mL,即 10μg/mL。 ③ 所有試劑在 37℃條件下孵育 5min,在 96 孔板中依次加入: 試劑(μL) 測定管 標準管(僅做一次) 樣本 20 標準品 20 試劑二 200 200 混勻,30s 于 530nm 讀取吸光值 A1,2min30s 時再 讀取 A2,△A=A1-A2。 【注】:1.加完試劑二反應即開始,若是批量檢測,建議加完樣本后,用排槍加試劑二,避本試劑盒僅供科研使用 2 免加樣時間造成測定誤差或者分批測定樣本。 2.若 A2 的值小于 0.2,可對樣本用蒸餾水稀釋后再測定。稀釋倍數(shù) D 代入公式計算。 3.若測定管的△A 小于 0.005,可增加樣本上清液體積 V2(如增至 50μL,則標準管多加 30μL 蒸餾水,保證兩管總體積一致),則改變后的 V2 代入計算公式重新計算。 五、結果計算: 1、按照體積計算: 溶*酶含量(μg/mL)=C 標準×△A 測定管÷△A 標準管×D=10×△A 測定管÷△A 標準管×D 2、按樣本鮮重計算: 溶*酶含量(μg/g)=(C 標準×V1)×△A 測定管÷△A 標準管×D÷(W×V2÷V) =10×△A 測定管÷△A 標準管÷W×D 3、按樣本蛋白濃度計算: 溶*酶含量(μg/mg prot)=(C 標準×V1)×△A 測定管÷△A 標準管×D÷(Cpr×V2÷V) =10×△A 測定管÷△A 標準管÷Cpr×D C 標準---標品濃度,200U/mL,即 10μg/mL; V1---標準品加樣體積,20μL=0.02mL; V2---樣本加樣體積,20μL=0.02mL; D---稀釋倍數(shù),未稀釋即為 1; V ---提取液,1mL; W---取樣質量,g; Cpr---樣本蛋白質濃度,mg/mL;建議使用本公司的蛋白含量測定試劑盒。