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土壤漆酶(S-Lac)活性檢測試劑盒,微板法
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【簡單介紹】
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土壤漆酶(S-Lac)活性檢測試劑盒,微板法
土壤漆酶(Laccase)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍氧化酶家族,具有較強的氧化還原能力。

土壤漆酶(S-Lac)活性檢測試劑盒,微板法

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本試劑盒僅供科研使用 1 土壤漆酶(Soil Laccase,SL)試劑盒說明書 (貨號:WS5230W 微板法 48 樣) 一、產(chǎn)品簡介: 土壤漆酶(Laccase)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍氧化酶家族,具有較強的 氧化還原能力。土壤漆酶分解底物 ABTS 產(chǎn)生 ABTS 自由基,在 420nm 處的吸光系數(shù)遠 大于底物 ABTS,測定 ABTS 自由基的增加速率,可計算得漆酶活性。 二、試劑盒組分與配制 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 液體 25mL×1 4℃保存 試劑二 粉劑×1 4℃保存 臨用前甩幾下,使粉劑落到底部, 再加 6mL 蒸餾水充分溶解,4保存一周,若變色則不能使用。 三、所需的儀器和用品: 酶標儀、96 孔板、可調(diào)式移液器、天平、低溫離心機、振蕩培養(yǎng)箱。 四、土壤漆酶活性測定: 建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗 樣本和試劑浪費! 1、樣本制備 取新鮮土樣風干或者 37 度烘箱風干,先粗研磨,過 40 目篩備用。 2、上機檢測: ① 酶標儀預熱 30min,調(diào)節(jié)波長到 420nm。 ② 在 EP 管中依次加入: 試劑名稱(μL測定管 對照管 樣本(g0.02 0.02 試劑一 200 300 試劑二 100 37℃振蕩反應 10min,12000rpm,4℃離心 5min,分別取 上清 200μL 轉(zhuǎn)移至 96 孔板中,于 420nm 處讀取吸光值 A, A=A 測定-A 對照(每個樣本做一個自身對照)。 A 差值較小,可增加樣本量或延長反應時間 T,則改變后的樣本質(zhì)量 W 和反應時間 T 則代入計算公式重新計算。 五、結果計算: 酶活定義:每克土壤每分鐘氧化 1nmol 底物 ABTS 所需的酶量為一個酶活力單位(U)。 SL 活性(nmol/min /g 土樣)=[A÷(ε×d)×V×109]÷W÷T=1.67×A÷W ε---ABTS 摩爾消光系數(shù):36×103L/mol/cmd---比色皿光徑,0.5cmV---反應總體積,0.3mL=3×10-4L; W---樣本質(zhì)量,g; T---反應時間,10min



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