上海宇淳生物科技有限公司
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參考價 | ¥ 2000 |
訂貨量 | 1 |
- 型號 1035
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- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 所在地 上海市
更新時間:2019-05-14 13:30:25瀏覽次數(shù):945
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Super Fluor 680 琥珀酰亞胺酯
Super Fluor 680 琥珀酰亞胺酯
1 mg | ¥2,000 |
5 mg | ¥4,680 |
1.4.3.1 裝填柱層析分離吸附柱
1) 提前用去離子水浸泡葡聚糖Sephadex過夜(1g 配5mLH2O),使其溶脹,打開孔狀結(jié)構(gòu)。
2) 濕法裝柱:裝填過程中確保PBS(10mM, pH=7.4)液面比Sephadex高,以防混入空氣而產(chǎn)生氣泡。先在柱子(13×100mm)內(nèi)注入3/4左右的PBS,而后加入Sephadex /PBS溶液;分批次、緩慢加入柱子內(nèi),后用塑料滴管吸取,沿著柱子四壁旋轉(zhuǎn),逐步、緩慢地加入,裝填至近滿,留下約3cm的空間以待注入熒光標(biāo)記蛋白溶液。
3) 在裝填的整個過程中打開活塞(淋出液用大燒杯承接),同時用玻璃棒+橡膠塞從下到上輕輕敲打柱子,使Sephadex裝填緊密,注意使柱子內(nèi)不得有氣泡,不得有斷層,使柱子豎直,確保頂部端面水平;故滴加Sephadex時應(yīng)旋轉(zhuǎn)加入,不得直接滴加,以免激起柱頂層。
4) 裝填完柱子后,用塑料滴管吸取PBS,沿管口四壁旋轉(zhuǎn)著緩慢加入,使PBS過一遍柱子,而后將PBS注入Sephadex頂部,以隔絕空氣,以免在柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡,關(guān)閉末端活塞。
1.4.3.2 過柱層析分離吸附柱(避光)
1) 打開柱子末端活塞,緩慢放出柱子頂層的PBS,待PBS液面剛與Sephadex柱子端面相平時,立即關(guān)閉活塞;注意:不要使PBS液面低于Sephadex柱子端面,以免混入空氣而在柱子內(nèi)產(chǎn)生氣泡;立即用塑料滴管吸取熒光蛋白溶液,沿柱子四壁旋轉(zhuǎn)緩慢加入(全部加完)。不要攪動Sephadex ,隨時保持其端面水平。