上海宇淳生物科技有限公司
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參考價(jià) | ¥ 680 |
訂貨量 | 1盒 |
- 型號(hào)
- 品牌 其他品牌
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷(xiāo)商
- 所在地 上海市
更新時(shí)間:2022-12-16 16:45:09瀏覽次數(shù):3532
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分類(lèi) | 其他 | 級(jí)別 | 其他 |
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同舟共濟(jì),與時(shí)俱進(jìn);實(shí)現(xiàn)夢(mèng)想,締造輝煌。用誠(chéng)信求生存,以成績(jī)謀發(fā)展,
CCK-8試劑盒利用了同仁化學(xué)研究所(Dojindo)開(kāi)發(fā)的四唑鹽——WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),它在電子載體1-Methoxy PMS存在的情況下能夠被還原成水溶性的甲臜染料。CCK-8溶液可以直接加入到細(xì)胞樣品中;不需要預(yù)配各種成分。CCK-8法是用于測(cè)定細(xì)胞增殖或細(xì)胞毒性試驗(yàn)中活細(xì)胞數(shù)目的一種高靈敏度,無(wú)放射性的比色檢測(cè)法。CCK-8被細(xì)胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的橙色甲臜染料能夠溶解在組織培養(yǎng)基中,生成的甲臜量與活細(xì)胞數(shù)量成正比。WST-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)的靈敏度比其它四唑鹽如MTT, XTT, MTS或WST-1高。由于CCK-8溶液相當(dāng)穩(wěn)定,并且對(duì)細(xì)胞沒(méi)有毒性,因此可以長(zhǎng)時(shí)間孵育。
CCK-8 試劑盒檢測(cè)步驟
1. 向各孔中加入100 μl細(xì)胞懸液。a)
2. 在37℃下預(yù)孵育培養(yǎng)板。b)
3. 向各孔中加入各濃度的待測(cè)溶液c)10 μl。
4. 37℃下孵育。
5. 向各孔中加入10 μl的CCK-8溶液d)。
6. 37℃下孵育1-4小時(shí)。e)
7. 測(cè)定450 nm處的OD值。
a) 使用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基制備50,000-100,000個(gè)/ml的細(xì)胞懸液。
b) 建議使用CO2培養(yǎng)箱過(guò)夜預(yù)培養(yǎng)。
c) 使用培養(yǎng)基或PBS來(lái)制備溶液。
d) 如果待測(cè)溶液有還原性,測(cè)定不含細(xì)胞,但含有CCK-8的待測(cè)溶液在450 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入CCK-8 ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的100 μl培養(yǎng)基和10 μl CCK-8進(jìn)行檢測(cè)。
e) 白細(xì)胞可能需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
活力計(jì)算
細(xì)胞活力*(%)=[A(加藥)-A(空白)]/[A(0加藥)-A(空白)] ×100
A(加藥):具有細(xì)胞、CCK-8溶液和藥物溶液的孔的吸光度
A(空白):具有培養(yǎng)基和CCK-8溶液而沒(méi)有細(xì)胞的孔的吸光度
A(0加藥):具有細(xì)胞、CCK-8溶液而沒(méi)有藥物溶液的孔的吸光度
*細(xì)胞活力:細(xì)胞增殖活力或細(xì)胞毒性活力