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上海博湖生物科技有限公司

主營產(chǎn)品: 高密度脂蛋白ELISA檢測試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測試劑盒

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TRzol LS(液體樣本 RNA 提取試劑)
TRzol LS(液體樣本 RNA 提取試劑)
參考價1076.4
具體成交價以合同協(xié)議為準
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    上海市

規(guī)格
50ml×21076.4元15 盒 可售

更新時間:2024-12-07 10:16:44瀏覽次數(shù):1610

聯(lián)系我們時請說明是環(huán)保在線上看到的信息,謝謝!

【簡單介紹】
貨號 P-PR1003
TRzol LS(液體樣本 RNA 提取試劑)產(chǎn)品儲存:TRzol在室溫下能穩(wěn)定保存12個月。盡管如此,為達到效果,我們建議保存在2-8℃的環(huán)境下。

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

商品屬性

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

P-PR1003

TRzol LS(液體樣本 RNA 提取試劑)

50ml×2

產(chǎn)品介紹:

儲存條件:

TRzol LS 在室溫下能穩(wěn)定保存 12 個月。盡管如此,為達到效果,我們建議保存在 2-8°C 的環(huán)境下。

重要提示:

有毒物接觸皮膚或者不慎吞服,會導致灼傷。一旦接觸皮膚后立即以大量的洗滌劑和清水清洗。若感不適,看醫(yī)生并尋求苯和其他成分的正確治療方案。

TRzol LS試劑是直接從細胞或組織中提取總RNA的試劑。它在破碎和溶解細胞時能保持RNA的完整性。加入氯仿后離心,樣品分成水樣層、中間層和有機層。RNA存在于水樣層中。收集上面的的水樣層后,RNA可以通過異丙醇沉淀來回收。無論是人、動物、植物還是細菌,該方法對少量及大量的組織和細胞均有較好的分離效果。TRzol LS 試劑操作上的簡單性允許同時處理多個樣品。所有的操作可以在一小時內(nèi)完成。TRzol 抽提的總 RNA 能夠避免DNA 和蛋白的污染,可用于 RNA 印跡分析、斑點雜交、poly(A)+篩選、體外翻譯、RNA 酶保護分析和分子克隆。如果是用于 PCR,當兩條引物位于單一外顯子內(nèi)時,建議用擴增級的DNase I 來處理抽提的總RNA。

注意事項:

1.從少量的組織(1~10mg)或細胞(10 2-10 4 個)中分離RNA 樣品:往組織或細胞中加 入 800µl TRzol。待樣品裂解后,加入氯仿并進行步驟 2 中的抽提操作。在用異丙醇沉 淀 RNA 之前,加入 5~10μg 無 RNA 酶的glycogen 作為水樣層的載體。為降低其黏度 在加入氯仿前用 26 號注射器抽吸兩次以切斷基因組DNA。Glycogen 會留在水樣層中 并和 RNA 共析出。在濃縮到 4mg/ml 之前它不會抑制逆轉錄反應鏈的合成也不會 抑制 PCR。

2.在勻漿化后和加入氯仿之前,樣品可以在-60℃或者-70℃保存至少一個月。將 RNA 沉淀溶于 75%的乙醇在 2-8℃至少可以保存一周,在-5—-20℃下至少可保存一年。

3.用 TRzol LS 抽提 RNA 時要戴手套和護眼罩。避免接觸皮膚和衣服。在化學通 風櫥完成操作。避免呼吸道吸入。如無例外,室溫保持在 15~30℃的條件下。

自備試劑:

氯仿 、 異丙醇、75%乙醇(RNase-Free water 配制)、RNase-Free water(將水加入 無 RNA 酶的玻璃瓶中,加入 DEPC 至 0.1% (V/V)。放置過夜并高壓滅菌)。0.5% SDS 溶液(RNase-Free water 配制)(可選)。

操作步驟:

1.樣品預處理 a.生物液體 每0.25ml液體樣品(血清,血漿等等)加入0.75ml TRzol LS,用加樣槍吹打液體樣品 幾次以幫助裂解樣品中細胞。每5~10×10 6個細胞至少加入0.75ml TRzol LS。對于含有高 污染物樣品如全血樣品,可以用滅菌水按照1:1比例稀釋一倍后開始提取。TRzol LS 和液體樣品的終體積比總是3:1。 b.組織 用glass或強力勻漿器攪勻組織樣品,每50~100mg組織或者0.25ml組織懸液加 0.75ml的TRzol LS。一般50~100mg組織體積都要小于0.25ml,如果組織樣品的體積小 于0.25ml,加入滅菌水將組織樣品體積調(diào)整到0.25ml以保證體積比例是3:1。 c.單層生長的細胞 直接往直徑3.5 cm的培養(yǎng)板中加入0.3ml-0.4ml的TRzol LS溶解細胞,用加樣槍吹打 幫助充分裂解細胞。依據(jù)培養(yǎng)板的面積而不是依據(jù)細胞的數(shù)量來決定所需的TRzol LS 量 (每10cm2加0.3-0.4ml)。不需要往裂解物里面加水,因為培養(yǎng)板中附著殘留的培養(yǎng)液 已經(jīng)充分稀釋了TRzol LS 。 d.懸浮生長的細胞 通過離心來沉淀細胞。在TRzol LS試劑中用移液管反復吹打來裂解細胞。每 5~10×10 6的動物細胞,植物或酵母菌細胞或每1×10 7細菌加0.75ml的TRzol LS。和步驟 b 一樣用滅菌水調(diào)節(jié)樣品體積到0.25ml。在加入TRzol LS前應避免洗滌細胞,因為那 樣會增加mRNA降解的可能性。破裂某些酵母菌和細菌可能需要使用勻漿器。 2.分離階段 將勻漿樣品在15-30°C條件下孵育5min以使核蛋白體分解。每0.75ml TRzol LS 加0.2ml氯仿。蓋緊樣品管蓋,用手用力搖晃試管15秒并將其在室溫下孵育2~15 min。 在2~8°C下以不超過12,000×g的離心力高速冷凍離心15 min。離心后混合物分成三層: 下層苯-氯仿層,中間層,上層無色的水樣層。RNA無一例外地存在于水樣層當中。 水樣層的容量大約為所加TRzol LS 容量的70%。

2.RNA 的沉淀 將水樣層轉移到一干凈的試管中,如果希望分離DNA和蛋白,有機層和中間層同 樣要予以保留。通過將水樣層和異丙醇混合來沉淀RNA。每0.75ml TRzol LS對應0.5ml 異丙醇。將混合的樣品在15-30°C條件下孵育10min并在2~8°C下以不超過12,000×g的離 心力高速冷凍離心10 min。RNA沉淀在離心前通常不可見,離心后會形成一膠狀片狀 沉淀附著于試管壁和管底。

3.RNA 的漂洗 移去上層懸液。用75%的乙醇(RNase-Free water配制)洗滌RNA沉淀一次,每0.75ml 的TRzol LS至少加1ml的75%乙醇。旋渦振蕩混合樣品并在2~8°C下以不超過7,500×g的 離心力高速冷凍離心5 min。

4.RNA 的再溶解 室溫簡單干燥 RNA 沉淀,不要在真空管里離心干燥 RNA。尤為重要的是,不能讓 RNA 沉淀干燥那樣會極大地降低它的可溶性。部分溶解的 RNA 樣品其 OD260 /OD280 比值<1.6 。用移液管分幾次移取 RNase-Free water 或 0.5%SDS 溶液 (RNase-Free water 配制)來溶解RNA(如果RNA 以后要用于酶切反應時,避免使用SDS。) RNA 還能被 甲酰胺(除去離子)再溶解并保存在-70°C。

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公司正在出售的產(chǎn)品:

5-NT ELISA Kit

組織胞漿菌通用PCR試劑盒

C-Peptide ELISA Kit

12-Hydroxyeicosatetraenoic Acid(12-HETE)ELISA Kit

preptin ELISA Kit

β-Defensins ELISA Kit

phosphorylated glycogen synthase kinase 3 beta (pGSK3B) ELISA kit

小麥矮腥黑穗病菌PCR試劑盒

C1INH ELISA Kit

HIV-1/HIV雙重PCR試劑盒

Amyloid beta 42(ABeta 42)ELISA kit

包納米蟲屬通用PCR試劑盒

人心肌轉錄因子GATA4 ELISA Kit

鮑皰疹樣病毒PCR檢測試劑盒

1,3-βD ELISA Kit

鮑球狀病毒PCR檢測試劑盒

t-PA ELISA Kit

組織胞漿菌通用PCR試劑盒

人高香草suan(HVA) ELISA Kit

(駱駝痘病毒PCR試劑盒

cAMP ELISA Kit

異尖線蟲(Ani)核suan檢測試劑盒

β-Thromboglobulin,β-TG ELISA Kit

組織胞漿菌通用PCR檢測試劑盒

11-dehydro-thromboxane B2,11-DH-TXB2 ELISA Kit

TRzol LS(液體樣本 RNA 提取試劑)5-NT 小鼠5核苷suanELISA檢測試劑盒

t-PA ELISA Kit

KIAA1199ELISA試劑盒

左右決定因子1(LEFTY1)ELISA試劑盒

1,3-βD葡葡糖苷(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒




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