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上海博湖生物科技有限公司
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血清實際從外觀和性能上篩選介紹
2023-3-6 閱讀(460)
在實際篩選時,主要從血清外觀和實驗操作時細(xì)胞的生長狀態(tài)進(jìn)行。
從外觀上:
1. 顏色:
根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,這個指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度。胎牛血清或多或少總有點溶血,因為胎牛血清凝血功能差,紅細(xì)胞容易破裂;
2. 澄清度:
高質(zhì)量的胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡;
3. 血清沉淀:
血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,對血清質(zhì)量沒有影響,沉淀的產(chǎn)生原因跟加工生產(chǎn)方式、是否反復(fù)凍融密切相關(guān),在實驗操作中可能會對細(xì)胞觀察產(chǎn)生影響。
從性能上:
1. 細(xì)胞形態(tài),在進(jìn)行血清篩選時首先觀察細(xì)胞的生長形態(tài)是否產(chǎn)生明顯變化,以及觀察貼壁細(xì)胞的貼壁情況,細(xì)胞在不同血清培養(yǎng)中可能會出現(xiàn)形態(tài)上的差異;
2. 倍增時間,一般情況下會選擇倍增時間短的血清,值得注意的是血清的影響會傳至5代,在進(jìn)行測試時,最好培養(yǎng)五代后進(jìn)行計倍增時間的計算;
3. 克隆形成率,測試時一般選50、100、200個細(xì)胞進(jìn)行平板克隆測試,平均5d左右換一次液,兩周后染色計數(shù),對比克隆形成情況。
血清的質(zhì)量,種類及使用的濃度都有可能影響細(xì)胞的生長,而不同批次的血清支持細(xì)胞生長的能力也不同,尤其是對克隆細(xì)胞的生長,某些批次血清可能含有毒性或抑制細(xì)胞生長的物質(zhì)。因此,在購買大量血清之前,必須對血清支持細(xì)胞生長能力進(jìn)行檢測,然后再大量購買質(zhì)量好的同一批號的血清。