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細(xì)胞培養(yǎng)

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幼蚊細(xì)胞;C6/36的培養(yǎng)細(xì)胞的運輸方法

2018-12-6  閱讀(147)

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【詳細(xì)說明】

培養(yǎng)細(xì)胞的運輸

裝運細(xì)胞的方法有兩種,一種為冷凍儲存運輸,即利用特殊容器內(nèi)盛液氮或干冰凍存, 保存效果較好,但較麻煩,且不宜長時間運輸,多需空運。另一種簡單的方法為充液法,

步 驟如下: [1] 選擇生長狀態(tài)良好的細(xì)胞,可直接根據(jù)路程時間來選擇接種細(xì)胞數(shù)量,一般以長滿 1/3—1/2 瓶底壁為宜,去掉舊培養(yǎng)液,補充新的培養(yǎng)液到達(dá)瓶頸部,保留微量空氣, 擰緊瓶蓋,瓶口用膠帶密封。

[2] 妥善包裝運送,并用棉花等做防震防壓處理。4—5 天可以到達(dá)目的地者一般放在貼身 口袋即可,到達(dá)目的地后倒出多余的培養(yǎng)液,僅保留維持細(xì)胞生長所需液量。37℃培 養(yǎng),次日傳代。

[3] 如果距離很近,如在統(tǒng)一城市內(nèi)或數(shù)小時路程,也可將細(xì)胞附著面朝上,或把培養(yǎng)液 全部倒掉放在胸bu口袋進(jìn)行運送。僅靠附著于細(xì)胞表面的培養(yǎng)液,可使細(xì)胞短時間不 致受損。

 多藥耐藥細(xì)胞的培養(yǎng) 多藥耐藥(Multidrug Resistance, MDR)是指腫瘤細(xì)胞接觸某一藥物,不僅對 此種藥物產(chǎn)生耐藥性,而且對其他結(jié)構(gòu)和功能不同的抗腫瘤藥物也產(chǎn)生交叉耐藥性的現(xiàn) 象,是造成失敗的主要原因。

耐藥指數(shù)(RF)=某種藥物針對抗藥性細(xì)胞的 IC50/某種藥物針對敏感性細(xì)胞的 IC50。 逆轉(zhuǎn)指數(shù)(reverse index, RI)=不加逆轉(zhuǎn)劑時某種藥物針對抗藥性細(xì)胞的 IC50/加入逆 轉(zhuǎn)劑后某種藥物針對抗藥性細(xì)胞的 IC50。 體外低濃度梯度遞增聯(lián)合大劑量間斷沖擊方法誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞對特定細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性。

第二節(jié) 細(xì)胞培養(yǎng)污染的檢測和排除 組織培養(yǎng)細(xì)胞被有害物污染是組織培養(yǎng)工作的大敵。應(yīng)用組織培養(yǎng)進(jìn)行研究工作,除需 要好的實驗設(shè)計和技術(shù)方法外,成敗的關(guān)鍵還在于能否避免污染。一項好的研究,或建成的滿 意細(xì)胞系,往往由于遭受污染而前功盡棄。

因此,一個組織培養(yǎng)工作者,要始終注意防止污染。 培養(yǎng)細(xì)胞被污染,人們注意的是真菌、細(xì)菌和病毒等微生物?,F(xiàn)在看來已經(jīng)不夠,當(dāng) 前“污染”一詞的概念應(yīng)該是,凡混入培養(yǎng)環(huán)境中對細(xì)胞生存有害的成分和造成細(xì)胞不純的異 物,都應(yīng)視為污染。

從這一概念考慮,組織培養(yǎng)污染應(yīng)包括以下幾個方面: 微生物:真菌、細(xì)菌、支原體和病毒 化學(xué)物質(zhì):影響細(xì)胞生存的非細(xì)胞所需的化學(xué)成分 細(xì)胞:非同種的其它細(xì)胞 當(dāng)然在培養(yǎng)中以微生物污染為多見,化學(xué)污染較少;

但近年隨細(xì)胞種類增多,不同種細(xì) 胞交叉污染卻屢有發(fā)生,以致在 ATCC 接受入庫細(xì)胞中特設(shè)同工酶檢測一項,目的在于證明 是否有 HeLa 等細(xì)胞的交叉污染。但細(xì)胞交叉污染只要工作細(xì)心,是容易防止的,而微生物 污染在實際工作中卻是難防止和易發(fā)生的。



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