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上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種 |
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人正常肺上皮細(xì)胞購買注意事項
2018-12-4 閱讀(167)
| 提 供 商 | 上海邦景實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 14KB |
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| 資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數(shù) | 167次 |
購買上海邦景物細(xì)胞注意事項（邦景生物）發(fā)布
一、客戶收到細(xì)胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照（建議受收細(xì)胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各一張），排除細(xì)胞本身污染的情況；
收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費發(fā)送一株細(xì)胞。
二、如為貼壁細(xì)胞，請在顯微鏡下觀察細(xì)胞密度：
1. 未超過80%匯合度時，用75%酒精（建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水，噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；然后打開蓋子，先用槍頭把培養(yǎng)基吸出10ml左右，放在離心管里，然后瓶口過火（嚴(yán)禁直接傾倒），這樣可以保證不污染，再用10ml的移液管，將剩余的培液全部吸出，放于離心管中，培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培養(yǎng)16hr(時間根據(jù)細(xì)胞生長情況調(diào)整）之后，傳代或者凍存。
2. 超過80%匯合度時，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：
1) 棄去培養(yǎng)液，用3ml PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次；
2) 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于T25培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來；
3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中，按要求分瓶。
三、如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
注意：換液時一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。
