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人胚腎細胞三點操作規(guī)程

2021-3-5  閱讀(254)

人胚腎細胞操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3、凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

人胚腎細胞我們的優(yōu)勢:

1、覆蓋歐美的采購中心,總部設立在美國新澤西,采購團隊有30多人,能進口涵蓋細胞,血清,抗體,蛋白,耗材等的全門類生物產(chǎn)品。

2、貨品多且全,目前,以我們美國公司為主體,與歐美600多個品牌建立了正式的代理與合作,基本涵蓋所有的生物試劑門類,特別是二三線高質(zhì)量品牌產(chǎn)品,優(yōu)勢更大!

3、現(xiàn)貨庫存,我們已經(jīng)在北京和天津建立了自營庫存,并將逐步建立上海庫存、武漢庫存、廣州庫存,目前涵蓋100個門類,將近50000個現(xiàn)貨產(chǎn)品!

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