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實時熒光定量PCR(RT-qPCR)四方面特性
2024-9-24 閱讀(49)
實時熒光定量 PCR (RT-qPCR) 是一種用于實時擴增和檢測特定 DNA 或 RNA 序列的分子生物學(xué)技術(shù)。該方法利用熒光染料或探針,當(dāng)與擴增的 DNA 或 RNA 分子結(jié)合時會發(fā)出信號,從而可以對目標(biāo)序列進行量化。RT-qPCR 通常用于基因表達分析、病毒載量定量和基因突變檢測等應(yīng)用。實時熒光定量PCR具備四方面特性:
1、由于實時熒光PCR采用封閉的檢測模式,因此擴增產(chǎn)物導(dǎo)致污染的可能性比普通PCR要小得多。
2、由于擴增產(chǎn)物的檢測在PCR擴增過程中同時進行,并且數(shù)據(jù)的采集、分析全部由儀器自動完成,因此整個檢測所需的時間比普通PCR要節(jié)省許多。
3、實時熒光PCR檢測模式功能強大,具備定性、定量、突變、多項目等檢測功能。而普通PCR要完成上述項目需采用不同的技術(shù)平臺。
4、實時熒光PCR進行定量檢測時,其定量線性范圍(5-6 logs)比普通PCR(2-3 logs)要寬得多。