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細胞活躍快樂實用方法小結
2024-5-20 閱讀(58)
細胞，生物學名詞，生物體的結構和功能的基本單位。一般具有細胞核、細胞質和細胞膜。植物細胞的細胞膜外還有細胞壁。體形極微，在顯微鏡下始能窺見。形狀多種多樣，主要由細胞核與細胞質構成，表面有薄膜。動植物細胞結構大致相同。植物細胞質膜外有細胞壁，細胞壁中常有質體，動物細胞質中常有中心體，而高等植物細胞中則無。細胞有運動、營養(yǎng)和繁殖等機能。細胞是許多生物學實驗的主角。如果細胞心情不好，那么實驗的結果也不會好到哪兒去。讓細胞快樂下面就仔細了解一下吧。
1. 確保所有實驗室材料都無菌
交叉污染是細胞培養(yǎng)的大敵。即使是最輕微的污染，也可能毀了幾個星期的成果。因培養(yǎng)箱內溫暖潮濕，真菌極易生長，因此必須注意定期清潔。此外，在將培養(yǎng)瓶、移液管及其他的相關物品放入超凈臺之前，應用酒精擦拭干凈，以避免污染。
2. 在使用前正確解凍細胞
盡管解凍看起來是個簡單的步驟，但必須操作得當，以免傷害細胞。長時間暴露在高溫條件下會使細胞無法鋪板。因此，凍存管應當在37°C水浴中放置2分鐘，然后用條件培養(yǎng)基稀釋，以避免DMSO造成直接傷害。
3. 小心處理您的培養(yǎng)物
細胞培養(yǎng)的脆弱性怎么強調也不為過。劇烈搖晃，或連續(xù)的溫度波動可能會對生長產生不利的影響。確保培養(yǎng)箱是水平的，溫度均一，且遠離電動儀器。此外，盡量避免一次處理多個細胞系，因為它可能會影響細胞的基因型和表型。您還應定期完成STR圖譜分析，以確認細胞系的身份。
4. 使用對數生長期的細胞
細胞培養(yǎng)過程共有3個階段：停滯期、對數期和平臺期，分別代表了低細胞生長、高細胞生長和無細胞生長。最有活力的細胞是健康的，快速分裂的，在對數期以70-80%的匯合度存在。
5. 在傳代之前不要讓細胞*匯合
匯合度是指貼壁細胞占據培養(yǎng)瓶表面積的比例。*匯合意味著100%的表面都被貼壁細胞覆蓋。一定要避免這種狀態(tài)，因為它意味著細胞不能繼續(xù)生長。不過，當務之急是使用活躍生長的細胞。
6. 選擇最佳的培養(yǎng)基開發(fā)策略
在細胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基是控制產品質量、產量和成本的最重要因素。必須針對每種培養(yǎng)物來定制培養(yǎng)基，以優(yōu)化實驗結果。在決定以哪種方式來開發(fā)您的培養(yǎng)基時，您有幾個選擇。您可以購買現成的，自己開發(fā)，也可以與另一家公司合作開發(fā)特定的培養(yǎng)基。在這個過程中，您需要考慮時間和成本等因素。
