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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進行，以促進細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細(xì)胞簡介：

小鼠支氣管成纖維分離自支氣管組織；支氣管（Bronchi），是指由氣管分出的各級分枝，由氣管分出的一級支氣管，即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較，前者較細(xì)長，走向傾斜；后者較粗短，走向較前者略直，所以經(jīng)氣管墮入的異物多進入右主支氣管。支氣管和氣管還有以區(qū)別就是，氣管是以“C"型的氣管軟骨為支架，而支氣管不是。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的支氣管成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。支氣管成纖維細(xì)胞在生理條件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài)，合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠支氣管成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠支氣管成纖維采用膠原酶-聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細(xì)胞。

?細(xì)胞計數(shù)?：使用血細(xì)胞計數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進行計數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達到一定密度時進行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human nerve protective factor (CVNPF) ELISA Kit 人神經(jīng)保護因子(CVNPF)ELISA試劑盒

HumanleukocyteaigenC,HLA-CELISAKit 人類白細(xì)胞抗原C(HLA-C)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-hepatitisBviruscoreaibody,HBcAbELISA試劑盒人抗乙型肝炎病毒核心抗體(HBcAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物0酸葡萄糖異構(gòu)酶(phosphoglucoseisomerase;GPI)活性光譜法定量檢測試劑盒20次

Humanverylowdensitylipoproteieceptor,VLDLRELISAKit人低密度脂蛋白受體(LDLR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠半乳糖6酯酶elisa試劑盒   小鼠半乳糖6酯酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠半乳糖6酯酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠半乳糖6酯酶試劑盒、小鼠半乳糖6酯酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲酸蛋白酶抑制劑elisa試劑盒   小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲酸蛋白酶抑制劑試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲酸蛋白酶抑制劑試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲酸蛋白酶抑制劑試劑盒、小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲酸蛋白酶抑制劑eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠內(nèi)毒素elisa試劑盒   小鼠內(nèi)毒素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠內(nèi)毒素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠內(nèi)毒素試劑盒、小鼠內(nèi)毒素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠膜聯(lián)蛋白elisa試劑盒   小鼠膜聯(lián)蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠膜聯(lián)蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠膜聯(lián)蛋白試劑盒、小鼠膜聯(lián)蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

大鼠白介素2可溶性受體(IL-2sR)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-2sR ELISA Kit

Mouse ierleukin 7 (IL-7) ELISA Kit 小鼠白介素7(IL-7)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-2(mouse IGBPF-2) 48T/96T 進口分裝

CLIAKitforIMA(MouseIschemiaModifiedAlbumin)ELISAKit小鼠缺血修飾白蛋白規(guī)格：48T/96T

通用型瓜類細(xì)菌性果斑病(西瓜果斑)(Acidovoraxavenaesubsp.ciulli;WatermelonFruitBlotch)試劑盒20次

ELISAKitINHBP大鼠抑制素結(jié)合蛋白規(guī)格：48T/96T

FGFR1重組小鼠 FGFR1 / CD331 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽) Protein

Apaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1 0.5mgApaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1)(CT) 凋亡蛋白活性因子-1(抗原)

UBA1重組人 UBE1 / UBA1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

EPHA4 Protein Human 重組人 EphA4 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

DDR2 Protein Rat 重組大鼠 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

小鼠支氣管成纖維細(xì)胞白介素31(IL31)重組蛋白 Recombinant Interleukin 31 (IL31)

EPHA4 Protein Human 重組人 EphA4 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

SERPINI1重組小鼠 SerpinI1 / Neuroserpin 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

IL1R1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL1R1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CRIP2重組人 CRIP2 蛋白 Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用