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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細(xì)胞簡介：

小鼠小腸隱窩上皮分離自小腸組織；小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內(nèi)，上連胃幽門，下接盲腸，分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的，因為食物經(jīng)過小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運動的機(jī)械性消化后，基本上完成了消化過程，同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點是管壁有環(huán)形皺襞，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺，其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切；構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞。柱狀細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似，絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能，其中以吸收和分泌功能為主。小腸腔面的環(huán)行皺襞從幽門附近開始出現(xiàn)，在十二指腸末段和空腸頭段極發(fā)達(dá)，向下逐漸減少和變矮，至腸中段以下基本消失。粘膜表面還有許多細(xì)小的腸絨毛，是由上皮和固有層向腸腔突起而成，形狀不一，以十二指腸和空腸頭段發(fā)達(dá)。絨毛于十二指腸呈葉狀，于空腸呈指狀，于回腸則細(xì)而短。環(huán)行皺襞和絨毛使小腸表面積擴(kuò)大20-30倍，絨毛根部的上皮下隱至固有層形成管狀的小腸腺，又稱腸隱窩，故小腸腺與絨毛的上皮是連續(xù)的，小腸腺直接開口于腸腔。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠小腸隱窩上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠小腸隱窩上皮采用先機(jī)械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細(xì)胞。

?細(xì)胞計數(shù)?：使用血細(xì)胞計數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠結(jié)蛋白(Des)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat ai ypsin (AT) ELISA Kit 大鼠抗(AT)ELISA試劑盒

HumanCollectinELISAKit 人膠原凝集素(Collectin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-cellmembraneDNAaibody,cmDNAELISA試劑盒人抗細(xì)胞膜DNA抗體(cmDNA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物原生質(zhì)細(xì)胞分離試劑盒5次

Humanα-Amylase，AMS/AMYELISAKit人α(AMS/AMY)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠白細(xì)胞介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-1β ELISA Kit

Mouse macrophage inflammatory protein 3 alpha (MIP-3 alpha /CCL20) ELISA Kit 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒

Mouseα1-microglobulin,α1-MGELISAKit 小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanOncogeneProteinp190/bcr-ablELISAKit人癌基因蛋白質(zhì)p190/bcr-abl規(guī)格：48T/96T

同位素核酸蛋白結(jié)合反應(yīng)試劑盒20次

sPECAM-1大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1規(guī)格：48T/96T

PLAU重組人 Urokinase / PLAU 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

無翅型MMTV整合位點家族成員2(WNT2)重組蛋白 Recombinant Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 2 (WNT2)

IFNA2重組人 Interferon alpha 2 / IFNA2 蛋白 Protein

EFNB1 Protein Human 重組人 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

HA Protein H9N2 重組甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞無翅型MMTV整合位點家族成員2(WNT2)重組蛋白 Recombinant Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 2 (WNT2)

EFNB1 Protein Human 重組人 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

PLAU重組人 Urokinase / PLAU 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

HA Protein H9N2 重組甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IFNA2重組人 Interferon alpha 2 / IFNA2 蛋白 Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用