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原代細胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。

大鼠嗅球神經(jīng)元細胞

商品屬性：

細胞簡介：

大鼠嗅球神經(jīng)元分離自嗅球組織；嗅球是脊椎動物前腦結(jié)構(gòu)中參與嗅覺的部分，用于感知氣味。嗅球分為二個不同的結(jié)構(gòu)：主嗅球及輔助嗅球。在大腦額葉來自許多嗅細胞的神經(jīng)纖維纏集在一起，形成線球狀的部分。在這里，纖維與多個次級神經(jīng)元——僧帽細胞的樹突相連接，進而由這里伸出神經(jīng)纖維形成嗅囊，終止于額葉下方。一般認為它在嗅味的辨別中具有重要的功能。對于大部份的脊椎動物而言，嗅球位在大腦的前面，不過人的嗅球位于大腦的內(nèi)部。嗅球由篩骨的篩板固定且保護嗅球，哺乳動物的篩板會分隔嗅球和嗅上皮，而嗅神經(jīng)會穿過篩板中的篩孔而連接到嗅球。嗅球分為二個不同的結(jié)構(gòu)：主嗅球及輔助嗅球。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠嗅球神經(jīng)元經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠嗅球神經(jīng)元采用消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學試劑抑制法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 神經(jīng)元細胞樣

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現(xiàn)“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

豬乙酰受體抗體(AChRab)ELISA 試劑盒 96T/48T

Ankle protein (talin) ELISA Kit 人踝蛋白(talin)ELISA試劑盒

Rabbitmaixmetalloproteinase1,MMP-1ELISAkit 兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforApaf-1(Humanapoptosisproteaseactivatingfactor-1)ELISAKit人凋亡蛋白酶激活因子1規(guī)格：48T/96T

血清樣品沉淀法去內(nèi)毒素試劑盒20次

PorcineIerleukin1β,IL-1βELISAKit豬白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉(zhuǎn)移趨化生長因子β   英文名稱：   Human ansforming Growth Factor β   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TGFβ

跨膜蛋白100   英文名稱：   Human ansmembrane protein 100   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TMEM100

轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白   英文名稱：   Human ansthyretin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   T

壞死因子α受體   英文名稱：   Human Tumor Necrosis Factor α Receptor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TNFαR

大鼠KiSS-1受體(KISS1R)ELISA試劑盒 ，英文名： KISS1R ELISA Kit

Rabbit iercellular adhesion molecule 2 (ICAM-2/CD102) ELISA Kit 兔子細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠可溶性腫瘤壞死因子-a受體(mouse sTNF-aR) 48T/96T 進口分裝

CLIAKitforICD(Humanisociatedehydrogenase)ELISAKit人異檸檬酸脫氫酶規(guī)格：48T/96T

通用型砷元素比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitCA-2大鼠酶2規(guī)格：48T/96T

FGFR3重組食蟹猴 / 恒河猴 FGFR3 / CD333 蛋白 (His 標簽) Protein

HtrA2/Omi peptide 絲蛋白酶/線粒體絲蛋白酶多肽抗原 0.5mgHtrA2/Omi peptide 絲蛋白酶/線粒體絲蛋白酶多肽抗原

NT5E重組人 CD73 / NT5E 蛋白 (His 標簽) Protein

BST2 Protein Human 重組人 TIN / BST2 / CD317 蛋白 (Fc 標簽)

CD80 Protein Mouse 重組小鼠 CD80 / B7-1 蛋白 (Fc 標簽)

大鼠嗅球神經(jīng)元細胞HtrA2/Omi peptide 絲蛋白酶/線粒體絲蛋白酶多肽抗原 0.5mgHtrA2/Omi peptide 絲蛋白酶/線粒體絲蛋白酶多肽抗原

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