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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細(xì)胞簡介：

大鼠心臟纖維原分離自心臟組織；心臟由心肌細(xì)胞和非心肌細(xì)胞組成，非心肌細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)的70%，其中90%以上的非心肌細(xì)胞由心肌成纖維細(xì)胞組成。纖維細(xì)胞是機(jī)能不活躍的成纖維細(xì)胞。胞體呈梭形，胞質(zhì)較少，弱嗜酸性，胞核小，染色深。電鏡下可見，細(xì)胞中粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體均不發(fā)達(dá)。當(dāng)組織受損時，纖維細(xì)胞可轉(zhuǎn)化為成纖維細(xì)胞而參與修復(fù)過程。纖維細(xì)胞和成纖維細(xì)胞是處于不同功能狀態(tài)的同一種細(xì)胞，如在組織損傷后的修復(fù)過程中，纖維細(xì)胞可轉(zhuǎn)化為功能活躍的成纖維細(xì)胞。纖維細(xì)胞較小，呈多角形，胞質(zhì)較少，弱嗜酸性，胞核亦較小，染色較深，電鏡下粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)較少，高爾基復(fù)合體不發(fā)達(dá)。成纖維細(xì)胞較大，呈星形或梭形，有突起，細(xì)胞核呈卵圓形，染色質(zhì)稀疏，染色淡，核仁明顯，胞質(zhì)較多。成纖維細(xì)胞能合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和蛋白多糖，形成膠原纖維、彈性纖維和網(wǎng)狀纖維以及基質(zhì)成分。心肌成纖維細(xì)胞主要功能為對心肌細(xì)胞起結(jié)構(gòu)支持作用并負(fù)責(zé)細(xì)胞基質(zhì)外的合成，當(dāng)心肌損傷時能產(chǎn)生旁分泌生長因子。心肌成纖維細(xì)胞是心臟結(jié)締組織中常見的細(xì)胞，可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維及有機(jī)基質(zhì)，并且在外傷等因素刺激下，部分纖維細(xì)胞可重新轉(zhuǎn)變?yōu)橛字傻某衫w維細(xì)胞，其功能活動也得以恢復(fù)，參與組織損傷后的修復(fù)。因此，對心肌成纖維細(xì)胞的生理學(xué)研究成為現(xiàn)代心血管領(lǐng)域研究的一個重點(diǎn)。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心臟纖維原經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心臟纖維原采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豬胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human cyclic adenosine monophosphate (cAMP) ELISA Kit 人環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒

RabbitEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 兔內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAP12ELISAKit大鼠apelin12規(guī)格：48T/96T

血清樣品液相法去內(nèi)毒素試劑盒20次

PorcineIerleukin13,IL-13ELISAKit豬白介素13(IL-13)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉(zhuǎn)基因植物NPTⅡ基因核酸檢測試劑盒   48T

轉(zhuǎn)基因植物Bar基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

轉(zhuǎn)基因植物Bar基因核酸檢測試劑盒   48T

轉(zhuǎn)基因植物TE基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

大鼠骨鈣素(OT)ELISA試劑盒 ，英文名： OT ELISA Kit

Rabbit ierleukin 1 (IL-1) ELISA Kit 兔子白介素1(IL-1)ELISA試劑盒

肺炎鏈球菌(SP)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMLCK(Humanmyosinlightchainkinase)ELISAKit人肌球蛋白輕鏈激酶規(guī)格：48T/96T

體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-9)明膠法比色定量檢測試劑盒20次

ELISAKitT犬睪同規(guī)格：48T/96T

CD47重組大鼠 CD47 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

GFAP(Glial Fibrillary Acidic Protein 0.5mgGFAP(Glial Fibrillary Acidic Protein) 膠質(zhì)纖維酸性蛋白(抗原)

STK16重組人 STK16 / PKL12 / MPSK 蛋白 (His & NusA 標(biāo)簽) Protein

BPI Protein Human 重組人 BPI 蛋白 (His 標(biāo)簽)

PLA2G1B Protein Mouse 重組小鼠 PLA2G1B / Phospholipase-A2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

大鼠心臟纖維原細(xì)胞GFAP(Glial Fibrillary Acidic Protein 0.5mgGFAP(Glial Fibrillary Acidic Protein) 膠質(zhì)纖維酸性蛋白(抗原)

BPI Protein Human 重組人 BPI 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CD47重組大鼠 CD47 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

PLA2G1B Protein Mouse 重組小鼠 PLA2G1B / Phospholipase-A2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

STK16重組人 STK16 / PKL12 / MPSK 蛋白 (His & NusA 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。