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大鼠小氣道平滑肌細胞

商品屬性：

細胞簡介：

大鼠小氣道平滑肌分離自小氣道組織；臨床上通常將內徑小于2mm的小細支氣管稱為小氣道。小氣道具有氣流阻力小，但易阻塞的特點。在平靜吸氣時，空氣進入狹窄的鼻咽部，產生渦流。由于小氣道已無軟骨支持，在脫離纖維鞘嵌入肺組織后，管腔通暢性不象軟骨性氣道，易于受胸腔的壓力變化的影響。小氣道上皮細胞形成連續(xù)呼吸道內層，作為隔絕外界有害物質的物理和功能屏障發(fā)揮著的作用。小氣道位于肺泡和氣管的交界處，這些細胞在功能上能夠調節(jié)免疫反應、產生化學因子進行宿主防御、表達粘附分子，并可能通過HLA-DR表達呈遞抗原；它們還能產生液體有助于肺液的平衡。許多呼吸道疾病，如哮喘、支氣管炎、慢性阻塞性肺病和囊性纖維化，都涉及呼吸道表面上皮細胞的破壞；小氣道上皮細胞的培養(yǎng)可為防止呼吸道擴增疾病和重塑提供新的治療選擇。小氣道平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。小氣道的生理功能特點：①小氣道阻力小；②氣流速度慢；③可調節(jié)控制通氣與血流比例。小氣管平滑肌細胞主要功能：①保持氣道張力維持小氣道形態(tài)；②肺小氣道進行氣體交換，病變可引起換氣功能障礙；③炎癥、痰液阻塞或當氣道外壓大于氣道內壓時容易造成小氣道閉合、萎陷。小氣管平滑肌細胞與主要病生理變化：①支氣管炎；②肺氣腫；③慢性阻塞性肺疾病。

方法簡介：

實驗室分離的大鼠小氣道平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質量檢測：

實驗室分離的大鼠小氣道平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：基礎培養(yǎng)基，含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關)，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

原代細胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數：用計數板計數，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。

公司正在銷售的產品：

小鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human cyclophilin A (CyPA) ELISA Kit 人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)ELISA試劑盒

HumanLeptinSolubleReceptor,sLRELISAKit 人可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-teichoicacidaibody,TAELISA試劑盒人抗0壁酸抗體(TA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物線粒體粗提分離試劑盒10次

Humani-iodothyronine，T3ELISAKit人三甲狀腺原(T3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠CXCR4(mouse CXCR-4)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

小鼠皮質(mouse Coicosterone)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

小鼠環(huán)氧化酶-2 (mouse COX-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

小鼠結締組織生長因子(mouse CTGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

大鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員1A(TNFRSF1A)ELISA試劑盒 ，英文名： TNFRSF1A ELISA Kit

Mouse granzyme B (Gzms-B) ELISA Kit 小鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒

MousesolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit 小鼠可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanImmunoglobulinM,IgMELISAKitM規(guī)格：48T/96T

微型RNA(miRNA)同位素探針制備試劑盒10次

ELISAKitAmAC-1大鼠巨噬細胞替代激活相關化學因子1規(guī)格：48T/96T

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乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)重組蛋白 Recombinant Milk Fat Globule EGF Factor 8 (MFGE8)

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FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (166 Arg, His 標簽)

NS2 Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Non-structural Protein 2 / NS2

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