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上海莼試生物技術(shù)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價(jià)格,ELISA試劑盒報(bào)價(jià) |
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更新時(shí)間:2017-06-09 11:01:14瀏覽次數(shù):426
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細(xì)胞名稱(chēng) tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類(lèi));Pan02-CAG-tTA-2D1
形態(tài)特性 多角
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 轉(zhuǎn)染pCAG-tTA質(zhì)粒,經(jīng)2.0ug/ml puromycin篩選,為T(mén)et-off穩(wěn)定調(diào)控細(xì)胞系,受Dox調(diào)控倍數(shù)在20~50倍。細(xì)胞倍增時(shí)間為24小時(shí)。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 5%FBS + 2.0ug/ml puromycin
傳代方法 1:4傳代,2~3天傳代一次。
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類(lèi)
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類(lèi));Pan02-CAG-tTA-2D1
實(shí)驗(yàn)方法和步驟
(一) 前處理 用臺(tái)稱(chēng)稱(chēng)量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動(dòng)物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時(shí)后,將動(dòng)物處死,用剪刀剪開(kāi)皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來(lái)回搓干凈。剪開(kāi)兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長(zhǎng)一點(diǎn)時(shí)間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時(shí)間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細(xì)胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細(xì)胞均勻分散,在酒精燈火焰上來(lái)回烤一下,以助染色體更好分散和展開(kāi)。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類(lèi)染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開(kāi)瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷(xiāo)售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶(hù)收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶(hù)需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶(hù)提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
肌肉生長(zhǎng)抑制素(MSTN)ELISA試劑盒 * ,英文名: MSTN ELISA Kit
肌肉磷酸果糖激酶(PFKM)ELISA試劑盒 * ,英文名: PFKM ELISA Kit
肌球蛋白重鏈9(MYH9)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: MYH9 ELISA Kit
肌球蛋白重鏈8(MYH8)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: MYH8 ELISA Kit
肌球蛋白重鏈7B(MYH7B)ELISA試劑盒 * ,英文名: MYH7B ELISA Kit
肌球蛋白重鏈7(MYH7)ELISA試劑盒 * ,英文名: MYH7 ELISA Kit
肌球蛋白重鏈6(MYH6)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: MYH6 ELISA Kit
肌球蛋白重鏈4(MYH4)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: MYH4 ELISA Kit
肌球蛋白重鏈2(MYH2)ELISA試劑盒 * ,英文名: MYH2 ELISA Kit
肌球蛋白重鏈11(MYH11)ELISA試劑盒 * ,英文名: MYH11 ELISA Kit
肌球蛋白重鏈10(MYH10)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: MYH10 ELISA Kit
肌球蛋白重鏈1(MYH1)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: MYH1 ELISA Kit
肌球蛋白輕鏈激酶(MYLK)ELISA試劑盒 * ,英文名: MYLK ELISA Kit
肌球蛋白輕鏈9(MYL9)ELISA試劑盒 * ,英文名: MYL9 ELISA Kit
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肌球蛋白ⅠE(MYO1E)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: MYO1E ELISA Kit
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肌聯(lián)蛋白(TTN)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: TTN ELISA Kit
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肌腱蛋白R(shí)(TNR)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: TNR ELISA Kit
肌腱蛋白N(TNN)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: TNN ELISA Kit