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上海莼試生物技術(shù)有限公司

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人癌細(xì)胞;MDA-MB-231
人癌細(xì)胞;MDA-MB-231
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更新時間:2017-06-08 13:39:26瀏覽次數(shù):452

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【簡單介紹】
人癌細(xì)胞;MDA-MB-231,采用干冰保存運輸收到細(xì)胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

細(xì)胞名稱  人癌細(xì)胞;MDA-MB-231  
形態(tài)特性   上皮樣  
生長特性  貼壁生長   
特征特性   MDA-MB-231是從一名51歲的白人女性癌患者的胸水中分離建立的。該細(xì)胞表達表皮生長因子EGF受體、TGF-α受體和WNT7B癌基因。   
培養(yǎng)條件   L15: Leibovitz Medium  10%FBS   
傳代方法   1:2~1:4傳代;每周2~3次。  
傳代情況  C5  
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS   
支原體檢測  培養(yǎng)法(-)   
STR   Amelogenin:X;CSF1PO:12,13;D13S317:13;D16S539:12;D18S51:11,16;D19S433:11,14;D21S11:30,33.2;D2S1338:20,21;D3S1358:16;D5S818:12;D7S820:8,9;D8S1179:13;FGA:22,23;TH01:7,9.3;TPOX:8,9;vWA:15,18;  
同工酶    
染色體   58~61,有巨核  
使用權(quán)限  A類人癌細(xì)胞;MDA-MB-231實驗方法和步驟
(一) 前處理 用臺稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時后,將動物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點時間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細(xì)胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細(xì)胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項:
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

應(yīng)用:利用分子篩作用,進行緩沖液交換、脫鹽,分離小分子,去除小分子;工業(yè)脫鹽。  
性狀:白色微球,多孔  
凝膠類型:凝膠過濾填料,親水型凝膠  
結(jié)構(gòu)成分:交聯(lián)右旋糖酐  
粒徑:細(xì)顆粒20-80μm,中顆粒50-150μm,粗顆粒100-300μm  
工作PH值:2-13  
操作溫度:4-40℃  
球蛋白分離范圍:1000-5000  
保存條件:4-25℃  
中文名稱:葡聚糖凝膠G-200;交聯(lián)葡聚糖G-200  
英文名字:Sephadex G-200  
應(yīng)用:利用分子篩作用,進行多肽分離、脫鹽、清洗生物提取液、分子量測定  
性狀:白色微球,多孔  
凝膠類型:凝膠過濾填料,親水型凝膠  
結(jié)構(gòu)成分:交聯(lián)右旋糖酐  
粒徑:40-120μm  
工作PH值:2-10  
操作溫度:4-40℃  
球蛋白分離范圍:3000-600000  
保存條件:4-25℃   
中文名稱:葡聚糖凝膠G-150;交聯(lián)葡聚糖G-150  
英文名字:Sephadex G-150  
應(yīng)用:利用分子篩作用,進行多肽分離、脫鹽、清洗生物提取液、分子量測定  
性狀:白色微球,多孔  
凝膠類型:凝膠過濾填料,親水型凝膠  
結(jié)構(gòu)成分:交聯(lián)右旋糖酐  
粒徑:40-120μm  
工作PH值:2-10  
操作溫度:4-40℃  
球蛋白分離范圍:5000-300000  
保存條件:4-25℃  
中文名稱:葡聚糖凝膠G-100;交聯(lián)葡聚糖G-100  
英文名字:Sephadex G-100  
應(yīng)用:利用分子篩作用,進行多肽分離、脫鹽、清洗生物提取液、分子量測定  
性狀:白色微球,多孔  
凝膠類型:凝膠過濾填料,親水型凝膠  
結(jié)構(gòu)成分:交聯(lián)右旋糖酐  
粒徑: 40-120μm  
工作PH值:2-10  
操作溫度:4-40℃  
球蛋白分離范圍:4000-150000  
保存條件:4-25℃  
類別:  蛋白質(zhì)Marker  
中文名稱:GE低分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)(GE17-0446-01)  
英文名字:GE LMW-SDS Marker Kit  
描述及應(yīng)用:  
通過和標(biāo)準(zhǔn)樣品對比,用PAGE檢測未知樣品蛋白含量。  
特點:  
根據(jù)遷移距離,可得清晰的條帶。  
通過考馬斯亮藍法或銀染法,可得到肉眼可見的蛋白染色條帶。  
產(chǎn)品組成:  
兔磷酸化酶b(1),67 μg,分子量(Mr) 97 000  
牛血清白蛋白(2),83 μg,分子量(Mr) 66 000  
雞卵清蛋白(3),147 μg,分子量(Mr) 45 000  
牛血碳酸酐酶(4),83 μg,分子量(Mr) 30 000  
大豆抑制劑(5),80 μg,分子量(Mr) 20 100  
牛奶α-乳白蛋白(6),116 μg, 分子量(Mr) 14 400  
分子量檢測范圍:  
14-97kDa。  
儲存條件:  
4℃,密封儲存。   
中文名稱:GE中分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)(GE17-0615-01)

 



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