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細(xì)胞名稱  EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞（傣族）；KM9405  
形態(tài)特性   淋巴母細(xì)胞樣  
生長(zhǎng)特性  懸浮生長(zhǎng)  
特征特性   該細(xì)胞來(lái)源于一傣族男性的外周血。1994年由昆明細(xì)胞庫(kù)通過(guò)EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。   
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  15%NBS  
傳代方法   1:2傳代；5-6天一次  
傳代情況  P4  
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　  
支原體檢測(cè)  熒光法（-）　  
STR   -  
同工酶    
染色體    
使用權(quán)限  A類 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞（傣族）；KM9405
實(shí)驗(yàn)方法和步驟
(一) 前處理 用臺(tái)稱稱量青蛙或蟾蜍的體重，然后按10微克／克動(dòng)物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時(shí)后，將動(dòng)物處死，用剪刀剪開(kāi)皮膚和肌肉，取出大腿骨和脛骨，剔凈股骨上的肌肉，然后用一小塊紗布來(lái)回搓干凈。剪開(kāi)兩端股骨，用注射器（內(nèi)裝5ml 1％ 檸檬酸鈉溶液）緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中，經(jīng)平衡后離心8分鐘，速度為1000轉(zhuǎn)／分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液，留沉淀物0.2ml，加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度，用吸管沖勻沉淀物，在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長(zhǎng)一點(diǎn)時(shí)間。
(四) 固定 低滲后，以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液，留0.2ml沉淀物，沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1～2次，離心的速度與時(shí)間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液，留0.2ml沉淀物，加4滴新配的固定液，沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片，每片滴3滴細(xì)胞懸液，立即用嘴向載片上吹氣，使細(xì)胞均勻分散，在酒精燈火焰上來(lái)回烤一下，以助染色體更好分散和展開(kāi)。 (六) 染色 用10：1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH＝6.8磷酸緩沖液稀釋)，然后用水沖洗，片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相，轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目，屬于大、中、小染色體各有多少條。
 
注意事項(xiàng)：
1.收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開(kāi)瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?，故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
粒徑： 40-120μm  
工作PH值：2-13  
操作溫度：4-40℃  
球蛋白分離范圍：≤1500  
保存條件：4-25℃  
中文名稱：葡聚糖凝膠G-25;交聯(lián)葡聚糖G-25(粗顆粒)  
英文名字：Sephadex G-25  
應(yīng)用：利用分子篩作用，進(jìn)行緩沖液交換、脫鹽，分離小分子，去除小分子；工業(yè)脫鹽。  
性狀：白色微球，多孔  
凝膠類型：凝膠過(guò)濾填料，親水型凝膠  
結(jié)構(gòu)成分：交聯(lián)右旋糖酐  
粒徑：細(xì)顆粒20-80μm，中顆粒50-150μm，粗顆粒100-300μm  
工作PH值：2-13  
操作溫度：4-40℃  
球蛋白分離范圍：1000-5000  
保存條件：4-25℃  
中文名稱：葡聚糖凝膠G-25;交聯(lián)葡聚糖G-25(中顆粒)  
英文名字：Sephadex G-25  
應(yīng)用：利用分子篩作用，進(jìn)行緩沖液交換、脫鹽，分離小分子，去除小分子；工業(yè)脫鹽。  
性狀：白色微球，多孔  
凝膠類型：凝膠過(guò)濾填料，親水型凝膠  
結(jié)構(gòu)成分：交聯(lián)右旋糖酐  
粒徑：細(xì)顆粒20-80μm，中顆粒50-150μm，粗顆粒100-300μm  
工作PH值：2-13  
操作溫度：4-40℃  
球蛋白分離范圍：1000-5000  
保存條件：4-25℃  
中文名稱：葡聚糖凝膠G-50;交聯(lián)葡聚糖G-50(細(xì)顆粒)  
 
英文名字：Sephadex G-50  
應(yīng)用：利用分子篩作用，進(jìn)行多肽分離、脫鹽、清洗生物提取液、分子量測(cè)定  
性狀：白色微球，多孔  
凝膠類型：凝膠過(guò)濾填料，親水型凝膠  
結(jié)構(gòu)成分：交聯(lián)右旋糖酐  
粒徑：細(xì)顆粒20-80μm，中顆粒50-150μm，粗顆粒100-300μm  
工作PH值：2-10  
操作溫度：4-40℃  
球蛋白分離范圍：1500-30000  
保存條件：4-25℃  
中文名稱：葡聚糖凝膠LH-20  
英文名字：Sephadex LH-20  
應(yīng)用：利用分子篩作用，適合用有機(jī)溶劑分離嗜脂性分子，可以非常濟(jì)地大規(guī)模制備各種天然產(chǎn)物；如：類固醇、萜類、脂類以及小分子多肽等  
性狀：白色微球，多孔  
凝膠類型：凝膠過(guò)濾填料，親脂型  
結(jié)構(gòu)成分：交聯(lián)葡聚糖  
粒徑： 100-200目  
工作PH值：2-11  
操作溫度：4-40℃  
排阻極限：4～5KD(與所用溶劑有關(guān))  
球蛋白分離范圍：100～4000  
保存條件：4-25℃  
中文名稱：瓊脂糖凝膠2B  
英文名字：Sepharose 2B  
性狀：白色微球, 無(wú)嗅、無(wú)味  
凝膠類型：凝膠過(guò)濾填料,凝膠層析介質(zhì)  
結(jié)構(gòu)成分：2%交聯(lián)度瓊脂糖