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上海莼試生物技術(shù)有限公司

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穩(wěn)定表達EBNA1的人胚腎細胞;293E
穩(wěn)定表達EBNA1的人胚腎細胞;293E
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更新時間:2017-06-08 11:32:12瀏覽次數(shù):328

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【簡單介紹】
穩(wěn)定表達EBNA1的人胚腎細胞;293E 收到細胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時銷售人員,我們將盡快為您解決。

公司是*的ATCC細胞供應(yīng)商,提供穩(wěn)定表達EBNA1的人胚腎細胞;293E的報價,咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
細胞名稱  穩(wěn)定表達EBNA1的人胚腎細胞;293E  
形態(tài)特性   上皮樣;多角   
生長特性  貼壁生長   
特征特性   該細胞來源于293細胞,穩(wěn)定表達EBNA1。   
培養(yǎng)條件   IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium  10%FBS   
傳代方法   1:6傳代;2天1次   
傳代情況  不詳  
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS   
支原體檢測  培養(yǎng)法(-)   
STR   Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12;D16S539:9;D18S51:18;D19S433:18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11,12;D8S1179:12,14;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19;  
同工酶    
染色體   14~25,51~64,有微核  
使用權(quán)限  A類 培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境:首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境,即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。

2、營養(yǎng)物質(zhì):細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH:細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。

4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時,通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu)。臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中,子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管,與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2,代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動脈將胎兒來的廢物運送至胎盤,臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運送給胎兒。  
臍帶是分娩過程中的廢棄物,雖然從臍帶中分離人臍動脈內(nèi)皮細胞方法相對HUEC更困難一些,但臍動脈種流的是靜脈血,使臍動脈內(nèi)皮細胞作為研究靜脈內(nèi)皮的工具細胞,在醫(yī)學和生物學研究領(lǐng)域中也有廣泛應(yīng)用。  
細胞特性  
1)細胞來源于人臍帶組織。  
2)細胞鑒定:血小板-內(nèi)皮細胞粘附分子(PECAM-1/CD31)或血管假性血友病子(WF)免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式:上皮樣細胞,貼壁培養(yǎng)。  
臍靜脈平滑肌細胞  
細胞詳述  
臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu)。臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中,子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管,與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2,代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動脈將胎兒來的廢物運送至胎盤,臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運送給胎兒。  
血管平滑肌是許多重大血管疾病的細胞基礎(chǔ);血管平滑肌細胞的異常增加的生長潛力在血管疾病發(fā)生過程中起決定作用。由于臍帶是分娩過程中的廢棄物,同時從臍帶中分離人臍靜脈平滑肌細胞方法相對成熟,使得體外培養(yǎng)的臍靜脈平滑肌細胞作為研究血管的模型細胞。  
細胞特性  
1)細胞來源于人臍帶組織。  
2)細胞鑒定:平滑肌肌動蛋白(α-SMA)免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式:梭形細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。  
脂肪間充質(zhì)干細胞  
細胞詳述  
脂肪間充質(zhì)干細胞是從脂肪組織中分離得到的一種具有多向分化潛能的干細胞。主要恢復組織細胞的修復功能,促進細胞的再生,恢復年輕面容的同時,身體機能也得到充分改善,有效改善亞健康、早衰等疾病,由內(nèi)而外真正的有效抵抗衰老。  
脂肪間充質(zhì)干細胞能夠在體外穩(wěn)定增殖且衰亡率低,同時它具有取材容易、少量組織即可獲取大量干細胞,適宜大規(guī)模培養(yǎng),對機體損傷小等優(yōu)點,而且其來源廣泛,體內(nèi)儲備量大,適宜自體移植,逐漸成為近年來新的研究熱點之一。  
細胞特性  
1)細胞來源于手術(shù)取得的正常人脂肪組織。  
2)細胞鑒定:CD44免疫熒光染色為陽性,CD45免疫熒光染色為陰性。  
3)鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式:成纖維樣細胞,貼壁培養(yǎng)。  
韌帶成纖維細胞  
細胞詳述  
韌帶屬于以彈性纖維為主的致密結(jié)締組織。粗大的彈性纖維或平行排列成束,如項韌帶和黃韌帶。韌帶白色帶狀的結(jié)締組織,質(zhì)堅韌,有彈性,能把骨骼連接在一起,并能固定某些臟器如肝、脾、腎等的位置。  
韌帶附著于骨骼的可活動部分,但限制其活動范圍以免損傷。當遭受暴力,產(chǎn)生非生理性活動,韌帶被牽拉而超過其耐受力時,即會發(fā)生損傷。  
細胞特性  
1)細胞來源于手術(shù)取得的正常人關(guān)節(jié)韌帶組織。  
2)細胞鑒定:纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(imentin)免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式:成纖維樣細胞,貼壁培養(yǎng)。  
牙齦上皮細胞  
細胞介紹  
牙齦是防止異物和細菌及其產(chǎn)物侵襲深層牙周組織的重要屏障。牙齦上皮細胞暴露于菌斑生物膜中,除發(fā)揮物理屏障作用外還可以發(fā)揮積極的先天抗菌作用,如牙齦
 



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